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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
216
- 英文名:
HotStart DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1kU|200U|500U
特别提示:包括热启动DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:热启动DNA聚合酶
英文名称:HotStart DNA Polymerase
产品货号:GS0015
产品规格:1kU|200U|500U
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
DNA聚合酶,适用于Hot Start PCR,由于
被化学修饰,所以抑制了Taq酶的活性。Taq
DNA聚合酶在室温的时候活力完全被抑制,
但是在94℃,10分钟时抑制失效,Taq酶
活力恢复,可聚合DNA,这种方法抑制了在
低温条件下由于引物非特异性退火或引物二
聚体引起的非特异性扩增。
特点
- 此酶还可以用于荧光定量PCR的扩增,且具有高效的扩增效率。
应用
复杂模板DNA的PCR扩增,复杂的cDNA为模板的PCR扩增(如RT-PCR),单链或双链DNA的测序,定点突变,Real-Time PCR
组份
热启动DNA聚合酶,5X PCR Buffer(含10mMMgCl2)
技术规格
| 储存 | -20℃ |
| 浓度 | 5U/μl |
| 保质期 | 24 months |
| 5X PCR Buffer | 含10mMMgCl2 |
| 单位定义 | 在75℃、30分钟内,使10nmol的dNTPs参入酸不溶性沉淀所需的酶量定义为1个活力单位(U)。 |
我公司销售的热启动DNA聚合酶报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝,请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时,DNA 聚合酶停顿,导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度,准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍,并且具有很高的产率。 Q
热启动PCR热启动PCR是除了好的引物设计之外,提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃,聚合酶在室温仍然有活性。因此,在进行PCR反应配制过程中,以及在热循环刚开始,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成,就会被有效扩增。在用于引物设计的位点因为遗传元件的定位而受限时,如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作,热启动PCR尤为有效。限制Taq DNA聚合酶活性的常用方法是在冰上配制
率仅为56%,Taq DNA聚合酶成功率也才62%,二者的产量明显低于Phusion® DNA聚合酶。而且从图中可以看出,Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,与Taq相当,但产量更高。这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。 超特异 ——减少非特异扩增 如果你的模板比较复杂,建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,因此活性被抑制,减少
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