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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
Trichomonas gallinae
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
英文名称:Trichomonas gallinae
规格:50T
编号:HE81541-R
分类:探针法荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒,其特征在于,由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成,其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶,上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列为:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型荧光探针为:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
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Diaporthe helianthi向日葵茎溃疡病菌PCR试剂盒
Diaporthe perniciosa苹果果腐病菌PCR试剂盒
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Dickeya chrysanthemi 菊迪卡氏菌PCR试剂盒
地榆皂苷I
地榆皂苷II
碘化木兰花
靛蓝
靛玉红
鸽毛滴虫探针法荧光定量PCR试剂盒进口试剂98%10g100g直接胆红素(DBIL)检测试剂盒(钒酸比色法)26S proteasome分子量:1万~2万 PLGA 75:2598%10gDOPAC
98%1g25g直接胆红素(DBIL)检测试剂盒(钒酸比色法)α5nicotinic acetylcholine receptorHPLC≥95%98%1gGLRX
60%正溶液, ca. 1.7mol/L250mg100g直接胆红素(TBIL)检测试剂盒(BOD微板法)soluble cluster of differentiation 14HPLC≥95%60%正溶液, ca. 1.7mol/L250mgCG
60%正烷溶液, ca. 1.7mol/L5g25g直接胆红素(TBIL)检测试剂盒(BOD比色法)Nitro reductaseHPLC≥95%60%正烷溶液, ca. 1.7mol/L5gColⅠ
98%10g100ml总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶微板法)Tyrosine-protein kinase receptor UFO分子量:1万~2万 PLGA 65:3598%10gColII
98%100g25ml总胆汁酸(TBA)检测试剂盒(酶比色法)Folate receptor1BR,不含酸(BD233510)98%100gS100A12
98%100mg500ml血浆氨(NH3)检测试剂盒(GDH比色法)trophoblast cell-surface antigen 298%98%100mgCCk
90%500mg25g尿素(Urea)检测试剂盒(酶偶联速率法)HLA-E98%90%500mgAng-II
AR,97%100mg5g尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏微板法)growth hormone releasing peptide-695%AR,97%100mgRNLS
97%25mg100g尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)Elastasee 495%97%25mgMRP2
内标对荧光定量PCR的影响:
1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,鸽毛滴虫探针法荧光定量PCR试剂盒进口试剂无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2.内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但仍然只是一种半定量的方法。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
上的DNA定量。这是DNA定量技术的一次飞跃。 根据最终得到的数据不同,定量PCR可以分为相对定量和绝对定量两种。典型的相对定量如比较经过不同方式处理的两个样本中基因表达水平的高低变化,得到的结果是百分比;绝对定量则需要使用标准曲线确定样本中基因的拷贝数或浓度。根据所使用的技术不同,荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言,探针杂交技术在原理上更为严格,所得数据更为精确;荧
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