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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 英文名:
IgG高速层析介质(4FF) IgG Beads 4FF
- 库存:
105
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
10mL
产品介绍
IgG高速层析介质(4FF)是以人IgG为亲和配体,一步纯化原核表达系统产生的蛋白A融合产品。蛋白A是一种分离自金葡萄球菌的细胞壁蛋白,主要通过Fc片段结合哺乳动物IgG。本层析介质是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,可以在相对较高的流速下进行纯化。
具体性1. IgG高速层析介质(4FF)产品性能ge
| 指标 | 性能 |
| 基质 | 高度交联的4%琼脂糖微球 |
| 配体 | 人IgG |
| 载量 | >2mg 蛋白A/ml 介质 |
| 粒径 (μm) | 45-165 |
| 大流速 | 0.3 MPa, 3 bar |
| pH 稳定范围 | 3-12 |
| 储存缓冲液 | 20% 乙醇 |
| 储存温度 | 2-8℃ |
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文献和实验一、原理在酸性条件下( pH4.5),非1gG的蛋白成份(包括白蛋白,部分Ig),能被辛酸等短链脂肪酸沉淀,上清中剩余的蛋白主要为IgG,再用硫酸铵沉淀上清,即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。二、材料与方法1、材料(1)动物腹水(2)辛酸(caprylic acid,CA),化学纯(3)硫酸铵,分析纯(4)SPA Sepharose 4FF亲合层析柱2、操作方法(1)蛋白含量测定紫外分光光度法测样品在波长260nm,280nm处的I及收光度(A 260
分子在纯化时若无商品化的亲和填料可供选择,也可以利用预活化填料,按照说明书介绍的流程,自行偶联生物分子到填料上,形成独有的亲和填料,来分离纯化其对应的生物分子,如酶/底物、抗原/抗体等。如需要纯化某种单抗,可以将相应的抗原偶联到预活化填料NHS activated Sepharose 4FF或CNBr activated Sepharose 4FF上,然后通过亲和层析实验,就可以实现抗体的高纯度纯化。偶联配基时,需要考虑活化基团是否与填料匹配,以及填料本身是否带有间隔臂。如果偶联的配基是蛋白
(adjust pH to 7.8 with Binding buffer; red color) to the Protein A column.Mouse antibodies of the IgG1 subclass do not have a high affinity for protein A. Purification on protein A beads using standard conditions will yield approximately 1/10
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