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文献和实验拿到一株"敲除细胞株",怎么判断它是不是真的合格?很多人在这一步只做一次 Western,看到条带变浅就认为成功了,等到投稿时才发现问题。 先说结论:验收要分四层——基因型(扩增子 NGS 确认双等位移码、无野生型 reads)、转录本(RT-qPCR 确认 mRNA 下降且排除 NMD 逃逸)、蛋白(Western 确认完全缺失、注意表位与半衰期)、功能(表型实验在两个独立克隆上重现)。此外还要检查细胞株的基础质量(支原体、身份鉴定、代次)。四层只做其中一层,都可能漏掉严重问题
不得与易燃、易爆或腐蚀性物品放在一起;所有贮存室入口处应设置放射性标志,贮存室要指定专人负责保管,领用、归还时必须进行登记,做到账物相符。运输包装分为四层,即内容器、防护容器、内层辅助包装、外层辅助包装。
报告单:检验报告单需经过消毒后方可发出,可用环氧乙烷气体熏蒸,也可用微波炉消毒处理。具体方法是:先将被消毒的报告单用塑料袋密封,然后在塑料袋外用湿毛巾包裹,放入微波炉内,用低、中火档照射5 min。如有条件,建议设立专门的清洁区打印报告单。(7)安全离开实验室:离开实验室时将手套,口罩等放置于有“生物废品”标记的容器,经高压消毒后丢弃,并将隔离衣物留在室内,放在污物袋中消毒。检测样品不能擅自带离实验室,如必须移出,应妥善覆盖,以防在转移过程中污染环境和他人。实验室的物品固定使用,未经消毒或隔离包装不得移出
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