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SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒

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  • 281-37703
  • 2025年07月17日
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    SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit新品速递图wako.jpg

    SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒

     

     

    本产品是一步法RT-qPCR检测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)Omicron毒株(B.1.1.529)中N区存在的特征性突变del31-33的试剂盒。del31-33 是指N区第31~33位中E、R 和 S三个氨基酸缺失的突变。Omicron毒株是在南非首次发现的变异株,在刺突蛋白中含有30多个突变。它比传统的变异株具有更高的传染性,因而被世界卫生组织(WHO)列为“关切变异株”(Variant of Concern;VOC)。

    本产品针对的是突变位点少的N区突变,并非突变位点多的S区。因此引物探针不会与其他突变位点产生反应、干扰测试,即可特异性、高灵敏度检测Omicron。

    经证实,本产品不与Alpha变异株、Beta变异株、Gamma变异株产生反应,只与Omicron毒株产生特异性反应。

     

    image.png

     

    SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒【281-37703

     

     

    ◆试剂盒组成

     

    20 Reactions

      RT 酶混合物(20×)

    20 μL×1

      一步反应混合物(2×)

    200 μL×1

      野生型引物&探针混合物
    (Wild Type Primer & Probe Mixture)

    10 μL×1

      N del31-33突变型引物&探针混合物
    (N del31-33 Mutant Type Primer & Probe Mixture)

    10 μL×1

     

     

    ◆特点

     

    ● 容易判断

    ● 使用突变型和传统型的引物/探针套装时,可通过比较Ct值进行判断

    ● 一步法RT-qPCR法快速检测突变

    ● 约70 min 即可完成

    ● 使用独立研发的引物探针进行高灵敏突变检测

    ● 当与其他突变体检测试剂盒组合使用时,所有变异株均可于同一反应条件下在1块96孔板上进行检测

    ● N501Y、E484K、L452R、E484Q、del247-253、N del31-33试剂盒的所有PCR反应条件相同,因此
    ● 可在1块96孔板上进行检测

     

     

    ◆检测原理

     

    采用TaqMan® 探针的1-step RT-qPCR。

     

      ▼使用前

      在病毒RNA量多的情况下,使用传统(非突变)型检测用的Wild Type Primer / Probe,也能在变异株中
      观察到扩增信号。
    请务必使用传统(非突变)型检测用的Wild Type Primer/Probe 和突变型检测用的
      Mutant Type  Primer/Probe两种进行检测。
    比较两种Ct值,若突变型检测用Mutant Type  
      Primer/Probe的Ct值较小,则判断该病毒为变异株。

     

     

    ◆实验案例

     

    变异株检测的应用数据

     

    用以下5种新型冠状病毒株的纯化RNA对本试剂盒进行测试:

    ● Omicron毒株(B.1.1.529):TY38-873P1,由日本国立传染病研究所提供

    ● alpha毒株(B.1.1.7):QHN001,N501Y突变,由日本国立传染病研究所提供

    ● Beta毒株(B.1.351):TY8-612,N501Y突变,E484K突变,由日本国立传染病研究所提供

    ● gamma毒株(P.1):TY7-501,N501Y突变,E484K突变,由日本国立传染病研究所提供

    ● 传统毒株(VR-1986HK):从ATCC购买的热灭活新型冠状病毒株

    样本拷贝数:5000拷贝/孔

    循环数:45

     

     

    ① Omicron株(B.1.1.529):TY38-873P1

     

    2116454141602730.png

     

    Omicron毒株在N区含有del31-33突变,因此N del31-33 Mutant type Primer / Prob的扩增曲线(红色)比Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)更早起峰。

     

     

    ② alpha株(B.1.1.7):QHN001

    2116454142067716.png

     

    alpha毒株在N区中不含del31-33突变,因此Wild type Primer / Probe(蓝色)的扩增曲线比 N del31-33 Mutant type Primer / Probe(红色)的扩增曲线更早起峰。虽然alpha毒株与Omicron毒株均含有N501Y突变,但经确认本产品不与alpha毒株产生反应。

     

     

    ③ Beta株(B.1.351):TY8-612

     

    2116454142748083.png

     

    Beta毒株在N区中不含有del31-33突变,因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线(红色)更早起峰。虽然Beta毒株与Omicron毒株均含有N501Y突变,但经确认本产品不与Beta毒株产生反应。

     

     

    ④ gamma毒株(P.1):TY7-501

     

    2116454143127405.png

     

    gamma毒株在N区中不含del31-33,因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线更早起峰。虽然gamma毒株与Omicron毒株均有N501Y突变,但经确认本产品不与gamma毒株产生反应。

     

     

    ⑤ 传统毒株(VR-1986HK):从ATCC购买的热灭活新型冠状病毒株

     

    2116454143424162.png

     

    传统毒株在N区中不含del31-33突变,因此Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线(红色)更早起峰。

     

     

    对照RNA的检测数据

     

    使用本试剂盒测定合成Omicron菌株的对照ssRNA。

     

    2116454144355822.jpg

     

    在不含N del31-33突变的对照ssRNA(Wild Type Control RNA)中,Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)比N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线(红色)更早起峰。

    在含N del31-33突变的对照ssRNA(N del31-33 Mutant Type Control RNA)中,N del31-33 Mutant type Primer / Probe的扩增曲线(红色)比Wild type Primer / Probe的扩增曲线(蓝色)更早起峰。

     

     

    PCR反应条件

     

    将板置于qPCR仪板,按以下流程设定。

     

    2116454144978113.jpg

     

     

    ◆变异株一览表

     

    变异株

    N501Y突变

    E484K突变

    L452R突变

    E484Q突变

    del247-253突变

    N del31-33突变

    传统毒株

    Alpha毒株
    (B.1.1.7)

    Beta毒株
    (B.1.351)

    Gamma毒株
    (P.1)

    Epsilon毒株(B.1.427/B.1.429)

    Kappa毒株(B.1.617.1)

    Delta毒株 (B.1.617.2)

    Lambda毒株 (C.37)

    Omicron毒株(B.1.1.529)


    ※含E484A突变

     

    产品编号 产品名称 产品规格
    281-37703 SARS-CoV-2 N del31-33 Mutation Detection Kit
    SARS-CoV-2 N del31-33 突变检测试剂盒
    20 Reactions


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