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- 2025年07月13日
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- 技术资料
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34
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详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
服务流程：
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
产品名称：脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Flavobacterium meningosepticum
编号：BJR2412
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
规格及成分：
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT（末端转移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
储存条件：
产品仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势：
1. 产品仅用于科研特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素：
脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
澳洲茄边减Solamargine0318-30-320mg 饮料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次 精氨酸双水解酶(绿脓杆菌) 20支 绿脓杆菌用 大鼠气管上皮细胞;RTE (硼酸)
长赤细菌 模式菌株，产生细菌叶绿素 支/瓶 大鼠肾系膜细胞;RMC
多巴;3-羟基-L-酪安醋Levodopa;3-xy7noxy-L-tyrosine
1929-9-7
HPLC≥98%,20mg/支 Rabbit oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 酸化K氏培养基 250g 用于果汁和浓缩果汁中环脂芽孢杆菌和其它的耐热耐酸菌的检测的。 SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞M-Cresol purple
脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Cholecalciferol (Vitamin D3)维生素D3标准品67-97-030mg×5ampules维生素D3标准品 Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 胰蛋白胨大豆琼脂5kg/袋一种通用培养基，用于各种微生物的培养 SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人细胞裂解液 (阳性对照) 灿烂蓝 Brilliant cresyl bulue 81029-05-2 5G 通用试剂
产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果：将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针（染料法只需设计引物）
2、抽提DNA、RNA，并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品（引物、RNA和cDNA）
产品名称：脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格：Flavobacterium meningosepticum
编号：BJR2412
分类：探针法荧光定量PCR
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
规格及成分：
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT（末端转移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
储存条件：
产品仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势：
1. 产品仅用于科研特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素：
脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
澳洲茄边减Solamargine0318-30-320mg 饮料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次 精氨酸双水解酶(绿脓杆菌) 20支 绿脓杆菌用 大鼠气管上皮细胞;RTE (硼酸)
长赤细菌 模式菌株，产生细菌叶绿素 支/瓶 大鼠肾系膜细胞;RMC
多巴;3-羟基-L-酪安醋Levodopa;3-xy7noxy-L-tyrosine
脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Cholecalciferol (Vitamin D3)维生素D3标准品67-97-030mg×5ampules维生素D3标准品 Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 胰蛋白胨大豆琼脂5kg/袋一种通用培养基，用于各种微生物的培养 SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人细胞裂解液 (阳性对照) 灿烂蓝 Brilliant cresyl bulue 81029-05-2 5G 通用试剂
产品及特点：
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂，得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速，尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速，整个过程只需要15分钟左右，不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式，在一个试管内完成所有操作，不容易交叉污染。常温运输及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化，适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果：将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子（约1/4 黄豆大小）或直径约为0.5-0.7 cm（或面积相当的其他形状）的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保温10-15 分钟，加入0.1 mL 溶液B，混匀，直接取上清液（相当于PCR 体积的1/10）作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
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文献和实验相关实验
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验，实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见，不过也有实验室前没有做过的，查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物，探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量PCR试剂盒，购买方便，价格便宜，并获得了国家相关认证。 值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量PCR技术的实际应用，国内外已将实时荧光定量PCR检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如： SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光PCR方法 GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT
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脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
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