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- HE80839-R
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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
Cryptococcus neoformans
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
| 产品名称 | 新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 |
| 英文名称 | Cryptococcus neoformans |
| 编号 | HE80839-R |
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：
1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的技术平台。
2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标：是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用产品及特点:
新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 是从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测 新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据 新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 成分，但不能检测其他非 新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用 成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR服务：
简介：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化；比较不同组织的mRNA表达差异；验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR技术服务，全部实验皆使用进口试剂完成，主要定量PCR仪器。
1、荧光定量PCR服务要求：
（01）请您提供新鲜的且尽量多的材料；或直接提供纯化好的总RNA（大于 5 ug/样品）；或直接提供纯化好的DNA（大于 5 ug/样品）。
（02）请提供已知的全长基因序列。
（03）请提供尽可能详细的背景资料：DNA/RNA 来源等
2、荧光定量PCR操作程序
（01）引物（探针）设计与合成。
（02）提取DNA/RNA，样本逆转录成cDNA。
（03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。
（04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。
3、荧光定量PCR的收费标准：
我公司根据客户的样品数量进行不同的收费标准。
Baicalein
Macranthoidin B
Pimpinellin
Asiaticoside
Asiatic acid
FosB抗体
FOSL1抗体
FOSL2抗体
FoxP1抗体
叉头蛋白3-T细胞转录因子
新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒怎么用25g100g液体生物防腐剂Probable ATP-dependent RNA Helicase DDX58BR，98%25gC3
5g1g布鲁诺广谱高效杀菌剂Virus Induced Signaling AdapterBR，98%5gC4
100g25g布鲁诺广谱高效杀菌剂Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase BetaBR，90%100gE2
1g5g1，3-二基脲Enah;Vasp Like ProteinBR，90%1gE
25g1g1，3-二基脲NAD-dependent deacetylase sirtuin-2BR，90%25gFSH
5g100g钯碳加催化剂ADCY8BR，90%5gGnRH
25g25g钯碳加催化剂Matrix Metalloproteinase 15AR，97%25gMCP-1
250g1g偶氮脒类引发剂V30Matrix Metalloproteinase 16AR，98%250gT
1g250mg偶氮脒类引发剂V30anti-sperm IgG antibodyBR，97%1gIKBα
25g1g偶氮脒类引发剂V50CUG-BPBR，97%25gCOX-2
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作者：上海市肺科医院呼吸科二科 徐金富 隐球菌肺病在我国中部及南部较多见，其临床诊断比较困难。培养鉴定和组织病理学虽然是诊断肺隐球菌病的金标准，但是前者阳性率低，后者是又创性检查。相比而言，抗原学检测方法有较大的优势，目前临床上主要依靠抗原检测做内科诊断。隐球菌荚膜多糖抗原是主要的检测目标抗原，其检测方法具体有乳胶凝集法（LA），酶联免疫法(EIA)和侧向层析法(LFA)。这些方法各有优势，分述如下。 LA原理是以乳胶颗粒为载体，表面联结有抗新生隐球菌
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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