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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
GAPDH Gene Endogenous Control Kit
- 供应商:
- 规格:
P4203-100MG
GAPDH Gene Endogenous Control Kit |
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| 目录号 |
规格 |
价格 |
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| QPG-03010 |
100 rxns |
¥1,000 |
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| QPG-03011 |
200 rxns |
¥1,500 |
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| QPG-03012 |
300rxns |
¥2,200 |
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| QPG-03013 |
500 rxns |
¥3,000 |
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| 试剂盒组成(40μl 反应体系×100次)
Real-Time PCR Master Mix(5×Conc.)* 1.0 ml×1支 Taq DNA polymerase (5U/μl) 40μl×1支 GAPDH RT Primer (50μM) 50μl×1支 dd H2 O 1ml×4支 *内含dNTP Mixture, Mg2+ , PCR引物,GAPDH荧光探针等。 |
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□产品特点 |
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| Ø 预先优化好的荧光定量PCR反应体系; Ø 应用TaqMan荧光PCR基因检测技术检测样本中GAPDH基因; Ø 实验操作简便,只需加入模板和Taq 酶即可。 Ø 可直接用于以GAPDH为内参照的基因表达定量研究。
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| □适用的荧光定量PCR仪器 | |||||||
| ABI PRISM 7000/7300/7500/7900 MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列 Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogen 3000 MX3000P/4000、FTC-2000
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文献和实验荧光定量 PCR 的主要用途之一是相对定量,而提到相对定量,必然离不开内参,那什么是内参基因?为什么相对定量必须使用内参?如何选择正确的内参基因?今天,我们就来聊聊关于内参的那些事。 什么是内参? 内参基因,也称为管家基因,其编码蛋白是维持细胞基本生命活动所必须的蛋白质。它的表达水平不受任何内源性与外源性因素的影响。管家基因高度保守且在大多数情况下持续表达,稳定表达于不同类型的细胞和组织中。 为什么相对定量必须使用内参? 那内参基因与相对定量又有什么样的关系呢?我们通过以下实验案例一起
内参就是内部参照,一般是指管家基因编码表达的蛋白,它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,保证实验结果的准确性。 此外,内参可以作为空白对照,还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个 WB 显色发光体系是否正常。内参抗体种类很多,比如 β-Actin、β-Tubulin、GAPDH 等,下面简单介绍下如何选择内参。 一、目的蛋白分子量 选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的
在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计,实验和分析siRNA效应
小时后后收获细胞,分别进行RNA水平分析和蛋白表达分析。 RNA纯化和分析:常规试剂盒抽提总RNA,以分光光度剂定量。目标靶mRNA的表达水平通过Northern或者是定量RT-PCR( ABI7700)双标探针检测。 蛋白表达分析:目标靶基因和无关对照的蛋白表达水平通过Western方法检测。或者用免疫荧光法检测。 对照:对于全部样品,在分析目标靶mRNAs和蛋白表达水平的同时,至少有一个不相关基因的mRNA水平和蛋白表达水平同时进行分析作为对照。 实验结果: 表
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