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- 百奥莱博
- GS1429-JVF
- 北京
- 2025年07月13日
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- 库存：
66
- 英文名：
Inclusion body Purgation buffer
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
冷冻(-20℃)
- 规格：
10次
特别提示：包括包涵体洗涤液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：包涵体洗涤液
英文名称：Inclusion body Purgation buffer
产品货号：GS1429
产品规格：10次
储存条件：冷冻（-20℃）
概述
细菌在进行重组表达的过程中，决大多数所表达的蛋白质以无定形，非水溶性的包涵体的形式存在，然而在包涵体中，真正的目的蛋白只占50%左右，此外还含有脂类、脂多糖、核酸和杂蛋白等其它成分，同时脂体及部分破碎的细胞膜及膜蛋白又与包涵体粘连在一起，而这些成分会影响包涵体蛋白的复性。故变性前应洗涤包涵体，以去除杂质含有RNA、DNA、脂多糖、脂蛋白等杂质，使得所得到的包涵体更加纯净，以方便于包涵体的溶解和复性等操作过程。本试剂采用还原剂、盐和蛋白变性剂，使包涵体溶解，从而释放蛋白质；内含作用强烈的蛋白酶抑制剂，从而保证了蛋白的完整性。适用于重组细菌中不溶性重组蛋白质-包涵体的变性提取，提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE或者在低温下的透析或稀释，以便尝试复性。
应用
该试剂盒可用于包涵体的溶解和复性等操作过程。
组份
溶液A，溶液B，固体C
我公司销售的包涵体洗涤液报价，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验条带说明，从左到右，或1234567..... 2、建议把流程中的各个部分所用缓冲液说明一下，例如： 破菌缓冲液:如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl 破菌方法：如超声，4s工作，4s间隙，冰水浴，共200次 包涵体洗涤液：如PBS（pH7.4，20mM PB，0.15N NaCl） 包涵体溶解液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素 柱平衡液：如pH8.0，20mMTris，0.5N NaCl，8M尿素，20mM 咪唑 柱淋洗液：如pH
HLA-I 重链、轻链的制备（包涵体的制备） 此步骤是用原核表达的方法制备HLA-I类分子的重链和轻链，其中重链为HLA-A2分子的α链（胞外段，包括α1至α3功能区），轻链为β2微球蛋白。HLA-A2分子的α链的C端连接有BSP（生物素结合部位），该部位是通过基因重组的方法将BSP序列与HLA-I类分子重链基因连接后，经过原核表达而获得。 【试剂及配制】 （1）LB培养基 （2）0.4M IPTG （3）50mg/ml 溶菌
可溶性的活性蛋白，须将洗涤过的包涵体重新溶解并进行重折叠。 （1）试剂与配制 ① 洗涤液I： 0.5 % Triton X -100 10 mmol / L EDTA (pH 8 .0 ) 溶于细胞裂解液中。 ② 2×凝胶电泳加样缓冲液。 （2）细胞裂解混合物12 000g 离心，15 min ,4 ℃ ；弃上清，沉淀用9× 洗涤液l 悬浮；室温放置5 min ; 12 000g 离心15 min ,4 ℃ ；吸出上清，用100 μL 水重新悬浮沉淀；分别取10 μL上清和重新悬浮
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