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- DOJINDO 同仁化学
- 343-0916
- 2025年07月15日
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利用活细胞分析lacZ报告基因的表达
SPiDER-βGal
SPiDER-βGal是检测具有细胞膜透过性及细胞内滞留性β-galactosidase的新型试剂。SPiDER-βGal具有较高的细胞膜透过性，因此可使用活细胞分析分析lacZ报告基因的表达。色素保留在细胞内，不会向外流出。因而，可进行单细胞层面的高灵敏度成像。
◆原理
SPiDER-βGal与β-galactosidase发生反应，生成名为quinone methide（醌甲基化物）的中间体，与附近的蛋白质中的亲核基团(SH基等)结合，形成稳定的共价键，从而具备荧光性质。
反应后的色素被固定在细胞内的蛋白质，滞留在胞内，可在单个细胞层面检测β-galactosidase表达细胞。
◆特点
● 可使用活细胞或组织进行单个细胞层面的表达细胞荧光成像，亦可使用X-gal等固定细胞
● 为探测物不向外流出，使用比以往更高灵敏度的β-galactosidase的荧光探针进行检测
β-galactosidase稳定细胞系HEK/lacZ 细胞（活细胞）的染色实例
黄色 : SPiDER-βGal 蓝色 : Hoechst 33342（※lacZ 表达细胞与未表达细胞以1 : 1比例混合）
◆利用SPiDER-βGal检测β-galactosidase
SPiDER-βgal可对固定细胞及活细胞进行染色，即使染色后进行固定化，也不会对色图产生影响。
◆固定化对染色的影响
细胞固定化会使GFP的荧光强度下降。但是，使用SPiDER-βgal进行染色，即使是固定细胞也具有较强的荧光性。
利用GFP-lacZ 融合质粒DNA，同时表达GFP及β-galactosidase的HeLa细胞的荧光色图
◆案例分析
果蝇组织的Live成像
用10 μmol/l SPiDER-βGal 和16 μmol/l Hoechst 33342对未固定的果蝇组织染色20-30分钟，共聚焦显微镜观察。
黄色：SPiDER-βGal
蓝色：Hoechst 33342
利用SPiDER-βGal在细胞内的高保留性，几乎完全不会渗出到邻近细胞；只对β-galactosidase（β-半乳糖苷酶）表达细胞进行单细胞层面染色。
老化细胞染色实例
利用H2O2老化诱导WI-38细胞的荧光显微镜及流式细胞仪分析
● 荧光显微镜下，通过SPiDER-βGal的荧光可以清晰观察到老化诱导的活细胞中SAβ-Gal表达显著。
● 与其他细胞老化标记相关的结果
● 流式细胞仪中，可以通过SPiDER-βGal荧光强度的变化来确认老化诱导的SAβ-Gal表达的增加。（右图）
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 343-09161 | SPiDER-βGal | 20μg×3 |
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文献和实验Protocols for Peptidomic Analysis of Spider Venoms
Spider venom contains a complex mixture of components with a large range of molecular masses (0.1–60 kDa) exhibiting a diverse array of actions. Most of these components are proteinaceous molecules – biologically active proteins and peptides
Purification and Characterization of Biologically ctive Peptides from Spider Venoms
Spider venoms represent invaluable sources of biologically active compounds suitable for use in life science research and also having a significant potential for biotechnology and therapeutic applications. The methods reported herewith
捕食性柞蚕害虫之一，主要危害1-2龄柞蚕。属蟹蛛科，蜘蛛目，学名为Xysticus ephippiafus Simon。为害柞蚕的蜘蛛种类很多，分布广，全国各柞蚕区均有发生。在辽宁地区已发现害蚕蜘蛛26种，主要种类除鞍形花蟹蛛外，还有三突花蛛、刺跗逍遥蛛、隆肩圆蛛等。 形态 成蛛中雌蛛体长7-8mm，体褐色或浅黄褐色，头胸背面两侧有黑褐色纵纹；中央浅褐色，并有一条浅褐色线。头胸部前缘有数根黑刺。第一、二对步足比后两对均长，且粗大，色泽较深，有深褐色斑点。雄蛛体长4-5
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