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- 百奥莱博
- BTN131005-NFV
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
326
- 英文名：
Second Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃
- 规格：
30次
特别提示：包括cDNA第二链合成试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：cDNA第二链合成试剂盒
英文名称：Second Strand cDNA Synthesis Kit
产品货号：BTN131005
产品规格：30次
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。
产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 5×cDNA第二链合成缓冲液 | 480μl |
| 20×cDNA第二链合成酶混合液 | 120μl |
| 0.2 M EDTA溶液 | 120μl |
| 超纯水 | 2ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：
| 成分 | 用量 |
| cDNA第一链合成反应液 | 10μl |
| 超纯水 | 48μl |
| cDNA第二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA第二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时 | |
| 自备的T4 DNA聚合酶 | 2μl |
| 轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟 | |
| 0.2M EDTA溶液 | 4μl |
注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。
我公司销售的cDNA第二链合成试剂盒北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
皿（3）试剂0.1%DEPC 水 液氮 mRNA纯化试剂盒 cDNA合成试剂盒Sephacryl S-400柱 0.5ug/uloligo(dT)15 10mmol/ldNTP0.1mol/l DTT 大肠杆菌DNA连接酶 M-MLV反转录酶T4DNA连接酶 T4多核苷酸激酶 20%甘油α-32P-dCTP Sephadex G-50 LB培养基SM缓冲液三. 实验操作程序（1）用北京华美代理Promega公司的PolyATract ○RmRNA Isolation Systems 从人胚
NaOH， 1mmol/L EDTA。 (4) 将胶浸入7% TCA中，室温放置30分钟(直至染料由蓝色变至黄色)，取出置滤纸上，干燥数小时。 (5) 用保鲜膜包裹干燥的胶，室温压X光片(用增感屏时-70℃压片)。 二、其它cDNA合成技术 除Riboclone M-MLV(H-)cDNA合成技术外，Promega公司还提供有多个AMV合成试剂盒，不同试剂盒所提供的引物或引物一延接头(Primpr-Adaptor)不同，有oligo(dT)15 引物、随机引物、XbaⅠ引物-延
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