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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR 产品仅供科研使用
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
产品名称:蜜蜂球囊菌探针法荧光定量PCR试剂盒
规格:Ascosphaera apis
编号:BJR2075
分类:探针法荧光定量PCR
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
规格及成分:
成 分 编 号 十孔盒包装
MMLV 逆转录酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀剂 50903 400 μL
TdT(末端转移酶) 120312 10 μL
2×TdT Buffer(含 dATP) 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0(含染料) 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手册 101105sc 1 份
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
储存条件:
产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
特点优势:
1. 产品仅用于科研特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素:
蜜蜂球囊菌探针法荧光定量PCR试剂盒参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
正辛基-beta-D-麦牙糖苷(>98% (HPLC),BC)n-Octyl-b-D-maltopyranoside质量规格:>98% (HPLC),BC Mousesolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISA试剂盒小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒规格:96T/48T 微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒 ,英文名: MTF ELISA Kit
壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside质量规格:>98%,BC 小鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒 ,英文名: sTLR2 ELISA Kit Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISA试剂盒小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺Z-Gln-OH质量规格:>98%,BR 大鼠维生素A(VA)ELISA检测试剂盒RatVitaminA,VAELISAKit 96T/48T C4ELISA试剂盒鲑鱼补体蛋白4规格:96T/48T
N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly质量规格:>98%,BR 人蛋酸酶2(2A),催化亚基,β亚型(PPP2CB)试剂盒 Human PPP2CB ELISA kit guineapigtissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
英文名称HumanHLA-1ELISAKit人组织相容性抗原(HLA-1)规格:96T/48T 19908-48-6高丽槐素品牌 Maackiain
超强化学封闭溶液10毫升 548-83-4高良姜素规格 Galangin
Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA试剂盒大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 26833-87-4高三尖杉酯碱厂家 Homoharringtonine
小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员2(PV2)ELISA试剂盒 ,英文名: PV2 ELISA Kit
犬内皮型合成酶(eNOS)ELISA检测试剂盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T 76-66-4钩藤碱品牌 Rhyncholphylline
62-46-4硫辛酸说明书 Lipoic acid 转基因油菜(canola)HCN92品系试剂盒20
62025-50-7人参皂苷F3品牌 Ginsenoside F3 转基因油菜(canola)GT73品系试剂盒20
62025-49-4人参皂苷F2说明书 Ginsenoside F2 转基因水稻LibeyLink62品系试剂盒20
62006-39-7洋川芎内酯A品牌 Senkyunolide A 转基因棉花SGK321品系试剂盒20
6199-67-3葫芦素B品牌 Cucurbitacin B 转基因棉花MON88913品系试剂盒20
蜜蜂球囊菌探针法荧光定量PCR试剂盒超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(附标准样)50 4547-24-4科罗索酸说明书 Corosolic Acid
RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISA试剂盒大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 83-67-0可可碱品牌 Theobromine
小鼠轴突生长诱向因子1(n1)ELISA试剂盒 ,英文名: n1 ELISA Kit
犬甲状腺素(T4)ELISA检测试剂盒Caninethyroxine,T4ELISAKit 96T/48T 611-71-2苦杏仁酸厂家 Mandelic acid
犬透明质酸酶3(HAase 3)试剂盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit 29883-15-6苦杏仁苷说明书 Amygdalin
产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1. 快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
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文献和实验相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
进行扩增杂交,操作按试剂盒说明书进行;采用空肠弯曲菌、解尿支原体作为对照菌进行荧光定量PCR。 【注意事项】 1. 配制和使用硝酸银溶液时要格外小心,不要滴洒在地上,桌上及手上等处,氧化为黑色的液点极难去除。 2. 荧光定量PCR操作时要戴口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作。 思 考 题 简述荧光定量PCR的基本原理。 (曲 萍)
:(各位大侠: 小弟最近做克隆实验遇到很大的障碍,已经连续三次失败了。请各位大哥帮助分析原因,小弟不胜感激! 我克隆的是一个肿瘤标志物的基因片段,长约150bp 。具体过程如下: 一, 普通PCR,电泳,切下特异条带; 二, 用QiaGene公司胶回收试剂盒提取特异条带DNA,所得胶回收产物约30ul。取2ul做荧光定量PCR(该方法条件优化已完成),证实胶回收产物中目的片段含量很高。 三, 用上海生工的PUCm-T载体试剂盒完成连接反应。按说明书操作,反应过夜。 四,
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