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- 百奥莱博
- QN2089-CRS
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
65
- 英文名：
Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存，避免反复冻融
- 规格：
50T|100T
特别提示：包括通用型反转录试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：通用型反转录试剂盒
英文名称：Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
产品货号：QN2089
产品规格：50T|100T
本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应。它采用 M-MLV 进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物用于后续的 PCR 扩增和分子克隆实验。
本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT 酶采用进口的 M-MLV，所以 cDNA 更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的 RNase 抑制剂可有效降低由于外源 RNase 污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于 cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
试剂盒组成 ：
| 组分 | 50T | 100T |
| M-MLV(200U/μL) | 50μL | 50μL×2 |
| 5×M-MLV Buffer | 200μL | 400μL |
| Oligo(dT)16(10uM) | 100μL | 200μL |
| RNasin(40U/μL) | 25μL | 50μL |
| dNTPs(10mM) | 50μL | 100μL |
| RNase-free ddH2O | 1mL | 1mL×2 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃保存，避免反复冻融，有效期1年
操作步骤(反转录反应) ：
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分：
1-5μg 总 RNA 或 50-500ng mRNA
2μL Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特异性引物
补 RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
4μL 5×M-MLV Buffer
1μL dNTPs
0.5μL RNasin
1μL M-MLV
3、42℃温浴 60min，如果是用随机引物，请先将离心管置 25℃温浴 10min，再 42℃温浴 60min。
4、95℃加热 5min 终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、若用于后续PCR扩增,用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50μL，取2-5μL作为 PCR 反应模板。
注意事项 ：
1、用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期12个月。
3、RNA 样品要避免反复多次冻融，应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。
我公司销售的通用型反转录试剂盒北京供应商，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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下，trizol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰，要么残留大量DNA，要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物，氧化破坏RNA，或者残留这些多糖多酚，色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制，市面上绝大多数的国产厂家是使用trizol的方法进行改良，无论是不是加了离心柱。但是实践证明，改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单：是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿，如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良。 第二种试剂盒失败的原因：直接裂解过柱
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