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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bisulfite DNA Modification Kit
- 库存:
678
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒(国产,进口)
产地:国产|进口
规格:50次
品牌:百奥莱博
编号:BTN100922
产品简介:
亚硫酸氢盐使DNA样品中的非甲基化的胞嘧啶C发生脱氨基反应变成尿嘧啶U,而甲基化的胞嘧啶不能发生脱氨基反应,碱基不发生转变。发生了C到U转化的DNA样品就可以用于后续的甲基化PCR或其他方法检测出来。
本产品是经典亚硫酸氢盐修饰和本公司专门开发的柱式单链DNA回收产品的结合,具有下列特点:
1.即开即用,免去单独购买和制备试剂的繁琐。
2.反应专一,可高效转化非甲基化C成U,转化率达99%。
3.专门的柱式单链DNA回收技术,使最终回收效率高达50%。
4.每次处理量在500 pg-5μg之间(最适处理量在2μg),尤其适用于微量样品及石蜡切片样品。
5.与多种后续反应兼容,如WGA(全基因组扩增)、PCR扩增、限制性内切酶消化、测序和微阵列分析等。
使用及效果:
将5 μL预配溶液A加入到45 μL的DNA溶液中,37℃放置15分钟,立即加入500 μL溶液B,轻柔颠倒混匀。55℃避光保温8-16小时后冰浴10分钟。加入1 mL通用溶胶液,颠倒混匀后上柱,12,000 rpm离心半分钟,加入0.7 mL通用洗柱液,12,000 rpm离心半分钟。加入50 μL溶液A稀释液,室温放置2分钟离心半分钟。37℃放置15分钟。加入0.7 mL通用溶胶液,混匀后上柱,12,000 rpm离心半分钟。加入50 μL DNA洗脱液,室温放置2分钟后离心半分钟,即可以得到亚硫酸氢盐修饰的DNA。
运输及保存:
常温,保存期为一年。
关于亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒(国产,进口)的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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文献和实验[原创]亚硫酸氢盐修饰DNA步骤<<DNA methylation>>译稿
亚硫酸氢盐修饰DNA步骤 一、内切酶作用体系:(自建立,试过,效果很好) EcoRⅠ TaKaRa 消化DNA 37℃ 3h ddH2O 11ul H溶液 2ul EcoRⅠ 1ul DNA 6ul 37℃ 孵育 3h 二、亚硫酸氢盐修饰过程:(翻译稿) 1. 用适合的内切酶消化大分子量的DNA(避免目的基因被切割),或者通过把DNA悬于蛋白酶k/SDS缓冲液,通过26 gauge needle 5次,37℃孵育30min(降低DNA大小,利于充分变性) 2. 加2.2
的后果是不仅没有RNA,连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。验证提取DNA的纯度的方法有二:1、紫外分光光度计计算OD比值;2、1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。第二种方法优于第一种方法,这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度,并根据Marker的上样量估计其浓度,以用于下一步的修饰。第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA如不特别指出,所用双蒸水(ddH2O)均经高压蒸汽灭菌。1、将约2μgDNA于1.5mlEP管中使用ddH2O稀释至50μl;2、加5.5ul新鲜配制的3M NaOH
简单,可以购买一个凝胶PCR产物回收试剂盒,国产的就很好、价格也合理,比如TIANGEN的产品(用过)。把切下来的胶按说明书操作即可。 几个细节: 1:PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,要使用新配的电泳液。凝胶浓度1%-2%均可。 2:凝胶DNA回收时在300nm紫外灯下观察条带位置,切取目的片断所在位置的凝胶,尽量小,保证特异性。 3:紫外照射时间不能过长,否则对DNA有损伤。 4:回收后的DNA如不马上用就储存于-20度,在数月内是很稳定的。 第六部分 PCR产物与T载体的连接
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