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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
149
- 英文名:
Caspase-4 Activity colorimetric assay Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
20T|50T|100T
特别提示:包括Caspase-4活性测定试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Caspase-4活性测定试剂盒
英文名称:Caspase-4 Activity colorimetric assay Kit
产品货号:QN2865
产品规格:20T|50T|100T
本试剂盒适用于测定哺乳动物组织、细胞caspase-4活性。测定原理基于Caspase-4特异水解其多肽底物Ac-LEVD-pNA,释放出游离的xiāo基苯ànpNA,后者呈黄色在405nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-4的水解活性。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-4可以和Apaf-1相互作用,并参与细胞色素c导致的Caspase-3激活,也可以和caspase-14相互作用。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格(100T) | 保存条件 |
| 裂解缓冲液 | 20ml | 4℃ |
| 反应缓冲液 | 10ml | 4℃ |
| 2mM Ac-LEVD-pNA底物 | 0.5ml | -20℃避光 |
| 10mM pNA标准品 | 0.5ml | -20℃避光 |
所需仪器:酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:最大吸收波长405nm,如不具备也可在400~450nm范围内测定。
我公司销售的Caspase-4活性测定试剂盒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
。试剂盒比较便宜,KeyGene公司有。 2. 流式细胞法,只要有流式细胞仪,买来试剂盒按照说明操作即可,优点是可以同时检测多种caspase的活性。价格较贵。 3. WB的方法,比较繁琐,通过半定量比较活化caspase蛋白(即裂解的小片段)的量判断活性强弱。 选择哪种方法根据实验要求和条件,1或2同3的联合使用,应该最能说明问题。附件是流式法的一个说明书,个人见解仅供参考。 yqsqzr 那是否可以通过流式
。Caspase-3 正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的 Caspase-3 由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase 的活性明显下降。➤ 研究方法1. 分别使用 RIPA 和 2%SDS + 超声提取未激活 T 淋巴细胞(Lanes 1 和 5)和激活的 T 淋巴细胞(Lanes 2-4 和 6-8)裂解细胞提取总蛋白2. WB 进行 caspase
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