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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
147
- 英文名:
GC-rich PCR Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷冻(-20℃)
- 规格:
50次|100次
特别提示:包括高GC含量模板PCR扩增试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:高GC含量模板PCR扩增试剂盒
英文名称:GC-rich PCR Kit
产品货号:GS0157
产品规格:50次|100次
储存条件:冷冻(-20℃)
概述
PCR反应中有时由于引物或模板中GC含量过高导致双链变性及引物与模板退火困难,并且普通Taq DNA Polymerase在98℃的时候很容易就失活,从而导致PCR失败。我司针对高GC含量和复杂二级结构的模板设计的PCR Buffer及Hot Taq DNA Polymerase可增强反应的特异性及稳定性,从而获得好的实验结果。影响PCR反应的因素很多,如果发现PCR反应没有得到所需产物或条带较弱,建议用试剂盒中提供的25mMMgCl2调节反应体系中的Mg2+浓度,以期获得更好的结果。
应用
GC含量小于80%PCR扩增
组份
Hot DNA Polymerase,5U/μl;10×GC Buffer(with Mg2+);10 mM dNTP Mix;sterilized ddH2O;操作手册
我公司销售的高GC含量模板PCR扩增试剂盒北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验时间 1 1 94 ℃ 4 min 35 1 94 ℃ 45 sec 2 58 ℃ 45 sec 3 72 ℃ 1.5 min 1 1 72 ℃ 5 min 2.高GC含量的片段扩增 a.人类基因组扩增(GC含量>60%) 模板:人类基因组 100 ng/50 μL Primer: PrimerF:5′-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3′ PrimerR: 5′-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3′ PCR扩增程序: 循环数 Step
的比值。△Rn:△Rn是Rn扣除基线后得到的标准化结果(△Rn=Rn-基线)。2.影响Ct值的关键因素模板浓度模板浓度是决定Ct的最主要因素。控制在一个合适范围内,使Ct在15-35之间。反应液成分的影响任何分子的荧光发射都受环境因素影响----比如溶液的pH值和盐浓度。PCR反应的效率PCR反应的效率也会影响Ct值。在PCR扩增效率低的条件下进行连续梯度稀释扩增,与PCR扩增效率高的条件下相比,可能会所产生斜率不同的标准曲线。PCR效率取决于实验、反应混合液性能和样品质量。一般说来,反应效率在90
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
性,与目的模板竞争引物和酶等,可能导致PCR扩增效率的下降,影响定量结果的准确性;另外,并不是每个基因都能在相邻的且大小合适的外显子上找到合适的跨内含子引物,所以,很大部分实验需要在一个外显子上设计引物,这时就必须经过去除基因组DNA步骤,才能得到准确可靠的结果。 传统基因组DNA去除的方法采用对RNA进行处理,由于引入了蛋白(DNase I),后续需要进行氯仿抽提纯化,操作繁琐,耗时长,RNA的回收率低。TIANGEN公司的FastQuantcDNA第一链合成试剂盒(KR106
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