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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 英文名:
转基因元件泛素基因启动子PCR试剂盒
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
转基因元件泛素基因启动子PCR试剂盒说明书运输及保存:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
本产品是即用型PCR试剂盒的改良产品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等所有PCR 所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行PCR 反应,具有广泛的用途。
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR 实验。
2. 快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
3. 本产品A 型含电泳染料,PCR 反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
4. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能扩增各种常见的DNA 样品。
5. 产物可直接用于T 载体克隆,不需要额外的加A 反应。
使用及效果:将本产品15 μL 与用户自备的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接进行PCR反应(PCR 参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL 电泳检查扩增结果。
| 产品名称 | 转基因元件泛素基因启动子PCR试剂盒说明书 |
| 编号 | HE62921-R |
| 货期 | 2-3天 |
物的设计原则:
1、产品名称引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。
2、 产物不能形成二级结构。
3、引物长度一般在15~30碱基之间。
4、G+C含量在40%~60%之间。
5、碱基要随机分布。
6、引物自身不能有连续4个碱基的互补。
7、引物之间不能有连续4个碱基的互补。
8、引物5′端可以修饰。
9、引物3′端不可修饰。产品仅限科研
10、引物3′端要避开密码子的第3位。
PCR引物设计的目的是找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功,但遵循某些原则,则有助于引物的设计。
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。产品仅限科研
技术概论:
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
PCR反应体系与反应条件
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u产品仅限科研
公司除转基因元件泛素基因启动子PCR试剂盒说明书正在热销外,以下产品也是公司正在打折促销产品:
BMP8ANP32C豚鼠白介素4(IL-4)免疫试剂盒
BMP6Adenosine deaminase豚鼠白介素22(IL-22)免疫试剂盒
Phospho-Bcl2 (Ser87)ASB4豚鼠白介素2(IL-2)免疫试剂盒
Phospho-Bcl2 (Thr69)ATRNL1豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)免疫试剂盒
phospho-Bcl-xL (Thr47)AFP4a豚鼠白介素1β(IL1B)免疫试剂盒
BDPAPBB2豚鼠白介素18(IL-18)免疫试剂盒
beta IV TubulinAPBB3豚鼠白介素17(IL-17)免疫试剂盒
beta subunit Cholera ToxinAPPBP2豚鼠白介素13(IL-13)免疫试剂盒
mammary carcinoma marker CA15-3,CA15-3 ELISA kitN-(2-酰胺基)-2-亚氨基二酸
papillomavirus antibody ELISA KitN-(2-酰胺基)-2-亚氨基二酸
papillomavirus antibody IgM ELISA KitN-(2-酰氨基)-亚氨基二酸二钠盐
papillomavirus IgG ELISA KitN-(2-酰氨基)-亚氨基二酸二钠盐
papillomavirus type 18 L1-capsids你2-氨基-2-基-1-醇
papillomavirus type 18你2-氨基-2-基-1-醇
papillomavirus type 16 L1-capsids你2-氨基-2-基-1,3-二醇
papillomavirus type 16你2-氨基-2-基-1,3-二醇
papillomavirus type 16你3-[N-(1,1-二基-2-羟基)]氨基-2-羟烷磺酸
Lactoferrin你3-[N-(1,1-二基-2-羟基)]氨基-2-羟烷磺酸
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文献和实验很耗时间; 2) 区域或者组织特异性不高:因为转基因小鼠依赖的基因敲除的特异性只能依赖于启动子的调控,而有些启动子并不能完全符合科研工作者对于区域或者组织特异性的要求,这样就会使实验结果不精确。 1.病毒依赖的基因重组 由于转基因动物依赖的基因重组存在以上不足,现在越来越多的科研工作者开始采用比较灵活的方式使用Cre-loxP系统。通过病毒引入Cre或loxP元件,结合一种转基因小鼠是比较常用的方式(图3)。相比于转基因动物依赖的基因重组,病毒依赖的基因重组有以下优点: 1) 更强
或S1作图精确定位TSS 引物延伸及s1核酸酶 保护 2)启动子区域(顺式作用元件)的确定 a)生物信息 学预测启动子区域 b)克隆5’-flanking sequence,并连接到报告基因 载体中 c)缺失、突变 d)荧光素酶活性分析 e)确定转录调控区域(启动子区域) 3)转录因子(反式作用元件)结合位点的确定 a)生物信息学预测转录因子结合位点 b)实验证实转录
1.常用载体分类:2,常用载体元件介绍:(1) 启动子:启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子;特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG,CMV,EF1a,PGK等,还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子;常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn,投射神经元特异性启动子
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