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- 2025年07月15日
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Ampdirect® Gene Amplification
新型PCR 扩增缓冲液
——无需提取DNA，直接PCR 扩增！
Ampdirect® Gene Amplification 是一款新开发的PCR 缓冲液，可有效降低PCR 反应体系里的蛋白质、糖类等各种PCR 抑制物对PCR 扩增的影响。应用广泛，适合对昆虫、植物、微生物、土壤、血液、石蜡切片等各类样品直接进行PCR 扩增。
◆优势
●省时省力省钱
无需DNA 提取，直接进行PCR 反应，节省时间
●适用于微量样品
因为不需要DNA 提取，不会产生样品损失，故此适用于微量样品
●热启动酶
厂家自行开发的高性能聚合酶BIOTAQ ™
●支持后续实验操作
扩增产物可用于后续的测序和RFLP 等片段分析
◆实验流程
◆原理
◆示例
注：动物样本，比如血液和黏膜细胞等可以直接加入PCR 反应液，不需消化处理。固体样本，比如植物和动物组织需要在含有SDS 和蛋白酶K的消化液中处理后再进行PCR 反应，或者使用FTA 卡收集植物组织中的DNA，取带有DNA 的FTA 卡加入PCR 反应液进行PCR 反应。
◆其他应用
●血清中病毒检出
●小鼠尾巴裂解液检测基因分型
●植物、血液/ 滤纸血液、土壤
●昆虫、石蜡切片等微量样品
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DNA 溶液的Eppendorf 管置于冰上。 (2)PCR扩增反应 (a)使用QIAGEN 的PCR Core Kit ,用四种不同的引物对来扩增纯化的DNA 。管A 含叶绿体DNA 特异性引物，管B 含LeCtin特异性引物，管C含NOS终止子特异性引物，管D含35S启动子特异性引物。每一管依次加入下列溶液： 33.9μl 的MilliQ水(总体积达50μl )，5μl10×PCR 缓冲液(100mM Tris-HCl buffer ，pH 8；500mM KCl ；15mM MgCl
&Epsilon；DTA）缓冲液(pH8.0)中重悬浮。DNA 在-20℃下贮藏30天。用GeneQuant Pro光谱仪定量分析每个提取样的DNA数量。每个组织的取样和处理都重复3次。 PCR扩增 依赖小麦微卫星引物gwm 493、gwm533 分析DNA的量。正向引物的5&prime；端用FAM、NED标记。由2µL DNA提取物(＜0.1-0.26µg/µL )、500p mol正向和反向引物、0.25mM dNTP、无MgCl2的 1×PCR缓冲液、2.5mM MgCl2 、1 .25
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