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- 2025年06月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
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20
- 英文名：
Epizootic Hematopoietic Necrosis Virus(EHNV)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
产品及特点:
流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
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3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包 3%钠碱性蛋白胨水
3%NaCl Alkaline Peptone Water 225ml/袋*10 3%钠碱性蛋白胨水颗粒
3% NaCl Tryptic Soy Agar 250g 3%钠胰蛋白胨大豆琼脂
3% NaCl MR-VP Medium 20支 3%钠MR-VP培养基
3% NaCl Alkaline Peptone Water 10个/包 含225ml 3%钠碱性蛋白胨水均质袋
2216E Liquid Medium 250g 2216E液体培养基
2216E Agar 250g 2216E琼脂
DMP1 抗體, 兔多抗
DMP1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純
DMRT3 特异性DMRT3蛋白抗体 特价促销
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DNA Ligase 1 DNA连接酶1抗体 特价促销
DNA Ligase IV/LIG4 DNA连接酶4抗体 特价促销
DNA PK/PRKDC DNA依赖性蛋白激酶抗体 特价促销
DNA Polymerase beta DNA聚合酶β抗体 特价促销
DNAH10 轴丝动力蛋白10抗体 特价促销
Anti-Glycine Receptor Beta Glycine 受体 Beta抗体（0.2 ml)
Anti-Glycine Receptor Alpha4 （extracellular) Glycine 受体 Alpha4 （胞外) 抗体（50 ul)
Anti-Glycine Receptor Alpha4 （extracellular) Glycine 受体 Alpha4 （胞外) 抗体（25 ul)
Anti-Glycine Receptor Alpha4 （extracellular) Glycine 受体 Alpha4 （胞外) 抗体（0.2 ml)
Anti-Glycine Receptor Alpha3 Glycine 受体 Alpha3抗体（50 ul)
Anti-Glycine Receptor Alpha3 Glycine 受体 Alpha3抗体（0.2 ml)
Anti-Glycine Receptor Alpha1 Glycine 受体 Alpha1抗体（50 ul)
Anti-Glycine Receptor Alpha1 Glycine 受体 Alpha1抗体（25 ul)
Anti-Glycine Receptor Alpha1 Glycine 受体 Alpha1抗体（0.2 ml)
Anti-Glycine Transporter 2 （GlyT2) （extracellular) Glycine Transporter 2 （GlyT2) （胞外)抗体（50 ul)
流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒脑成纤维细胞 规格:5 × 105次方（1ml）
神经小胶质细胞 规格:5 × 105次方（1ml）
雪旺氏细胞 规格:5 × 105次方（1ml）
食管癌组织源性原代细胞 规格:5 × 105次方（1ml）/1ml
胃癌组织源性原代细胞 规格:5 × 105次方（1ml）/1ml
肝癌组织源性原代细胞 规格:5 × 105次方（1ml）/1ml
原代滑膜皮细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
原代骨骼肌细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
原代神经元细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
原代神经胶质细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
原代单核细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
原代软骨细胞特制无血清添加剂 规格:1ml
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
| 产品名称 | 流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Epizootic Hematopoietic Necrosis Virus(EHNV) |
| 编号 | EY00P3994 |
流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
产品及特点:
流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非流行性造血器官坏死病毒探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
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6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
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其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
技术原理：
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。目前被普遍使用的多种常规PCR方法如各种凝胶电泳PCR法，终点荧光定量法或PCR-ELISA法叫做终点PCR法。实时荧光定量PCR法最大的优点是克服了终点PCR法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差，实现DNA/RNA的精确定量。普通PCR技术发明于1983年，而实时荧光定量PCR技术发明于上世纪九十年代并于1996年生产出了世界上第一台实时荧光定量PCR仪，实时荧光定量PCR技术得以实现的技术要素主要有荧光定量PCR试剂盒和实时荧光定量PCR仪，我国荧光定量PCR试剂盒研发实力强大，生产厂家较多
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