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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Chlamydophila psittaci
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输,-20℃保存,有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
| 产品名称 | 鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Chlamydophila psittaci |
| 编号 | EY00P3851 |
产品及特点:
鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因,是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因,因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针,能专一性地检测出样品中的鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒成分,但不能检测其他非鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作,降低了交叉污染。
5. 快速,整个检测过程(按一个样品计)所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研,足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒,其特征在于,由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成,其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶,上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列为:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型荧光探针为:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤:
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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鹦鹉热嗜衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒煌绿乳糖胆盐肉汤 (BGLB) 用于大肠菌群、大肠杆菌的测定(SN标准)Brilliant Green Lactose Bile Broth250
EC 肉汤 用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(SN标准)E.Coli Broth250
伊红美蓝琼脂 (EMB)弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌(SN标准)Eosin-Methylene Blue Agar250
营养肉汤 (NB) 一般细菌培养、转种、复壮、增菌等(GB标准)Nutrient Broth250
营养琼脂 (NA) 细菌计数、不含糖,可作血琼脂基础和传代用(GB标准)Nutrient Agar250
乳糖胆盐发酵培养基 用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)Lactose Bile Broth250
HPMEC-c 人肺微血管内皮细胞(HPMEC) 500,000cells 脑动脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人细胞裂解液 (阳性对照)
HPAEpiC细胞,人肺泡上皮细胞 小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞 CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2
T-24(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP
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文献和实验网络 第三节 鹦鹉热衣原体 鹦鹉热衣原体C.psittaci 的主要宿主是禽类,所以提出了另一个病名称鸟疫 (Ornithosis),以示该病的传染源不限于鹦鹉科鸟类,而包括家禽和野禽在内的诸多鸟类。其次宿主为人类以外的哺乳动物,人只是在接触这种动物后才会受到感染。人类有无原发性的鹦鹉热感染问题,尚在争论之中。但人类的鹦鹉热作为一种养禽业的职业
佚名 鹦鹉热衣原体C.psittaci 的主要宿主是禽类,所以提出了另一个病名称鸟疫 (Ornithosis),以示该病的传染源不限于鹦鹉科鸟类,而包括家禽和野禽在内的诸多鸟类。其次宿主为人类以外的哺乳动物,人只是在接触这种动物后才会受到感染。人类有无原发性的鹦鹉热感染问题,尚在争论之中。但人类的鹦鹉热作为一种养禽业的职业病已被医学界所公认。
生素、磺胺敏感,能抑制生长。1957年开始将衣原体分类于细菌类。 衣原体广泛寄生于人、哺乳动物及禽类,仅少数致病。据抗原构造、包涵体的性质、对磺胺敏感性等的不同,将衣原体属分为沙眼衣原体(C.trachomatis)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)肺炎衣原体(C.pneumonia)三个种(表18~1)。其中沙眼衣原体又有三个生物变种,即沙眼生物变种、性病淋巴肉芽肿(LGV)生物变种和鼠生物变种。沙眼生物变种还有A~K14个血清型(包括Ba、Da、Ia)。LGV生物变种还有4个血清
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