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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
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25
- 英文名：
Cephalosporium spp.
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50T
【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
产品及特点:
头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
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CD116 / GM-CSFR 抗體 (APC), 兔單抗
CD116 / GM-CSFR 抗體 (FITC), 兔單抗
CD116 / GM-CSFR 抗體 (PE), 兔單抗
CD116 / GM-CSFR 抗體, 鼠單抗
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CD117/c-kit/SCFR 干细胞生长因子受体/细胞表面分抗原抗体 特价促销
CD11b/c equivalent CD11B/CD11C抗体 特价促销
CD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M 整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 特价促销
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CD123 / IL3RA 抗體, 鼠單抗
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), Cy5 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), Cy5偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), Cy3 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), Cy3偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), Biotin Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), Biotin偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 680 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 680偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 647 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 647偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 594 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 594偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 555 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 555偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 488 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 488偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 405 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 405偶联
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7), AbFluor!" 350 Conjugated PCNA小鼠单克隆抗体(1D7), AbFluor!" 350偶联
头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒Mannitol Salt Agar
麦康凯肉汤 选择性培养基，用于水、食品中革兰氏阴性、乳糖发酵大肠杆菌群的检测500g
MacConkey Broth
麦康凯琼脂 乳糖发酵基础上鉴别分离肠杆菌500g
MacConkey Agar
紫红胆盐葡萄糖琼脂 鉴定和计数食品及乳制品中的胆盐耐受型革兰氏阴性菌500g
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 WEHI 22.1(B淋巴细胞)
CL-0308TE-13(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2
VNN1 Others Mouse 小鼠 VNN1 / Vanin-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
PC9人肺癌细胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS
IL18 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 标签)
小鼠胰岛细胞完全培养基 100mL
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
| 产品名称 | 头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
| 英文名称 | Cephalosporium spp. |
| 编号 | EY00P3835 |
头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
产品及特点:
头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非头孢霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
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其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
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文献和实验相关实验
【公告】丁香通试用中心：10月免费试用装精选（10月18日有更新）
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒（常温裂解）：一步法 PCR；处理鼠尾样本无需加热；用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒：无需进行 DNA 纯化；高效特异性扩增样品；用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒：无需预处理血液；世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系；安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒：整套试剂盒RNase-Free；RNA得率高；质量高；安全快速。 有奖免费试用： RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
-A尾巴的RNA分子加上一串A尾巴，然后用带有一段通用序列（universal tag）的Oligo-dT及RT酶来合成cDNA。这样设计的一个好处就是一次RT反应合成了所有miRNA分子以及其他小RNA、mRNA对应的cDNA，接下来想用来检测什么都可以，细细算来省了不少特异引物和多次RT反应的钱呢！整个RT反应操作也是非常简单，加入预先混好的酶，37℃孵育60min，95℃孵育5min即完成cDNA合成。 最后一步就是取出一点cDNA为扩增模板，加入正反引物和real-time PCR 试剂盒
状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合，其荧光增加1000倍。所以，一个反应发出的全部荧光信号与出线的双链DNA量呈比列，且会随扩增产物的增加而增加。 SYBR Green I荧光染料与DNA双链的结合双链DNA结合染料的优点：实验设计简单，仅需要2个引物，不需要设计探针，无需设计多个探针即可以快速检验多个基因，且能够进行熔点曲线分析，检验扩增反应的特异性，低的初始成本，通用性好，因此国内外在科研中使用比较普遍。荧光探针法（Taqman 技术）：PCR
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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