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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
384
- 英文名:
Pfu DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
500U|3000U
特别提示:包括Pfu DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Pfu DNA聚合酶
英文名称:Pfu DNA Polymerase
产品货号:ALH223
产品规格:500U|3000U
本酶用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和平末端补平等。是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌中分离纯化的, Pfu DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,能纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配。Pfu酶是目前已发现的所有耐高温DNA Polymerase中出错率最低的。其PCR产物为平端,可直接用平端载体克隆。 高保真PFU对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。本酶浓度为5U/μl。
本品组份(500U):
Pfu DNA Polymerase———————————————500U
10×Pfu Buffer+(with MgSO4)-——————————1ml
SuperPure dNTP mix(10 mM Each)—————————0.2ml
单位定义:一个单位Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:50mM Tris-HCl(pH 8.2),0.1mM EDTA,1mM DTT,Stabilizers,50% glycerol。
10×Pfu Buffer (含Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH8.8),100 mM KCl,100 mM(NH4)2 SO4,20 mM MgSO4,其他成分。
注意事项:
(1) Pfu酶具有3′-5′的外切酶活性,所以Pfu酶扩增时延伸速度比Taq酶低,应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间,建议Pfu酶的延伸速度为每分钟1kb 如扩增片段小于4kb;延伸速度为每分钟0.5kb 如扩增片段大于4kb。同时Pfu酶的3′-5′的外切酶活性可能降解引物, 所以应先加dNTP 后,再加Pfu酶到反应体系中,并立即进行PCR 反应。
(2) 用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱基,Tm在55~80℃ 之间,引物浓度在0.1~0.5μM之间,比Taq酶略高。
(3) Pfu酶的热稳定性比Taq酶好,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃,对Pfu酶的活性无影响。
(4) 高保真PFU 对于dNTP纯度要求很高,因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。
储存条件:-20℃。
本制品别名:pfu酶
我公司销售的Pfu DNA聚合酶现货供应,pfu酶质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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请教:高保真酶 关于taq plus 求教Pfu酶作PCR的要求 Pfu扩增求救!!!! 请问哪一种高保真DNA聚合酶比较好呢? Pfu DNA 聚合酶的问题 pfu的扩增条件! 关于高保真酶问题? 求助:高保真酶 关于高保真酶 关于高保真的酶 pfu高保真酶怎么那么难用? Pfu DNA聚合酶------常见问题 请教如何做病毒的 pfu 请教Pfu扩增2kb片段 高保真酶咋还不如普通的Taq酶? 请教关于高保真酶问题 哪个公司
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