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- caiyoubio
- P8870-200
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
110
- 规格：
200ml/KIT
检测指标更直接
小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒与传统的检测线粒体膜电位方法相比，能够更直接地检测线粒体通透性转换孔开放程度的变化；
荧光探针毒性更低
由于C2012 Calcein AM (钙黄绿素AM)的毒性特别低，并且不会抑制细胞的增殖、趋化性等绝大部分功能，所以与其它同类产品如CFDA SE等相比是更适合染活细胞的荧光探针；
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兼容性好
后续还可进行其他非绿色荧光染色，例如采用Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒(C1065)或细胞凋亡与坏死检测试剂盒(C1056)检测细胞凋亡、Mito-Tracker Red CMXRos (C1049)检测线粒体活力、Hoechst 33342活细胞染色液(C1027/C1028/C1029)染色细胞核等。
图1. 线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒原理图。荧光探针钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein AM)通过被动运输进入活细胞后被酯酶(Esterase)催化生成钙黄绿素(Calcein)，整个细胞都呈现很强的绿色荧光；含Co2+)处理后，呈现绿色荧光的Calcein结合钴离子生成没有荧光的Calcein-2Co，但正常情况下线粒体的MPTP没有打开，从而钴离子不能进入线粒体，因此此时仅线粒体中呈现绿色荧光；如果采用阳性对照钙离子载体(Ionomycin)处理后，钙离子大量进入细胞内和线粒体基质，导致MPTP打开，使部分Calcein从线粒体内释放，和胞浆中的钴离子结合而失去荧光。同时钴离子进入线粒体内从而使线粒体内呈现绿色荧光的Calcein也生成了没有荧光的Calcein-2Co。如果有样品可以诱导MPTP的部分或全部打开，就会导致线粒体中的绿色荧光减弱甚至消失。这样就可以根据线粒体中Calcein绿色荧光的强弱来判断线粒体MPTP开放的程度，绿色荧光越强，开放程度越低，绿色荧光越弱开放程度越高。
图2. 使用线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒检测MPTP开放的效果图。Calcein AM (1X)与L-929细胞进行孵育，细胞质包括线粒体发出强绿色荧光(A)；细胞进一步与CoCl2 (1X)孵育以后，细胞质内Calcein的绿色荧光被CoCl2淬灭，仅留下线粒体内的绿色荧光(B)；使用Ionomycin (1X)处理细胞，诱导细胞外的Ca2+大量进入细胞内，过多的Ca2+进入线粒体基质，导致MPTP的开放，使部分Calcein从线粒体内释放，同时使钴离子进入线粒体内并导致Calcein的绿色荧光淬灭(C)；使用解耦联剂CCCP和FCCP (5μM)处理细胞，虽然线粒体膜电位丢失，但短时间内不会直接引起MPTP的开放，因此线粒体内绿色荧光强度无明显变化(D、E)。
小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒注意事项：
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
Calcein AM在潮湿环境中容易分解，并避免反复冻融，收到产品后建议分装并-20℃密封保存。
由于Calcein AM在PBS等水溶液中不稳定，配制成工作液后需尽快使用。
培养液中的血清和酚红对Calcein AM的染色有一定的影响，建议在加入Calcein AM工作液前充分洗涤细胞。
Calcein AM标记的细胞，荧光均匀，而且对短期细胞迁移示踪效果非常好，但荧光的持续时间与细胞类型、培养条件等因素相关，一般在几小时之内，而且有时也会被某些类型细胞迅速外排。如果需要长时间标记细胞，请使用CFDA SE (C1031)等荧光探针。
小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。8-Azaguanine 8－氮杂鸟嘌呤小鼠脏器组织淋巴细胞分离液试剂盒
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血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒操作指南（DP304）——动物组织
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