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- 百奥莱博
- YT392-EOG
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
192
- 英文名：
M-MuLV Reverse Transcriptase
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
2000U
特别提示：包括M-MuLV反转录酶(逆转录酶)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：M-MuLV反转录酶(逆转录酶)
英文名称：M-MuLV Reverse Transcriptase
产品货号：YT392
产品规格：2000U
本品是一种经过改造和优化的M-MuLV反转录酶(RNase H-)。和普通的M-MuLV反转录酶相比，M-MuLV反转录酶(RNase H-)也是一种依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶，可以以RNA或DNA为模板在引物存在的情况下完成互补DNA链的合成；但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性，不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA。M-MuLV反转录酶(RNase H-)是最常用的反转录酶之一。
特点：M-MuLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达13kb的cDNA，而普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)仅能合成长达9kb的cDNA；M-MuLV反转录酶(RNase H-)的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性，可以避免普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
用途：M-MuLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成。M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。M-MuLV反转录酶(RNase H-)也可以用于DNA探针的标记，通过引物延伸(primer extention)来分析RNA，以及用于基因芯片荧光探针的标记。
来源：本M-MuLV反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达，表达的基因为经过突变优化的编码Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。
活性定义：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。
纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。
酶储存溶液：50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X)：250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。
失活或抑制：70℃孵育10分钟可以导致M-MuLV反转录酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对M-MuLV反转录酶(RNase H-)有抑制作用。
本产品中M-MuLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl，用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。
储存条件：-20℃。
我公司销售的M-MuLV反转录酶(逆转录酶)现货供应，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。 二、实验试剂 Taq酶，M-MLV逆转录酶，dNTPs， DEPC处理水，双蒸水，大肠杆菌总RNA 三、实验 仪器 电泳仪， PCR仪，高速离心机，移液器，电泳仪，电泳槽，紫外分析仪 四、操作步骤 1．cDNA的合成： 逆转录体系的组成： 2．PCR扩增特异性片段 （1）25ul PCR体系
-MULV反转录酶 1 μL 置于 42℃水浴，1h。 ③ 70℃保温5min（使酶失活）。 ④ 于-20℃保存备用。 PCR 扩增目的基因 以反转录产物为模板，克隆引物B1，B2为引物，利用rTaq酶进行扩增目的基因，用于后续连入克隆载体的操作，然后再以表达引物EB1，EB2为引物，利用Pfu DNA聚合酶进行扩增目的基因，用于后续连入表达载体的操作。 94 ℃ 3 min 94 ℃ 45Sec
混合后，70℃水浴5 min（破坏二级结构），再冰浴5min。 ② 在管中依次加入 (反应体系为20 μL)： RT 5×buffer 4μL RNasin 1μL dNTP ( 10mM) 2μL 混匀，37℃ 5min。 M-MULV反转录酶 1 μL 置于 42℃水浴，1h。 ③ 70℃保温5min（使酶失活）。 ④ 于-20℃保存备用。 PCR 扩增目的基因
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