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- 康朗生物
- KL-W-A002
- 国产/进口
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 检测方法：
微量法
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 规格：
100管/96样
试剂盒名称：NAD-苹果酸脱氢酶（NAD-MDH）测试盒
规格：100管/96样
保存：2-8℃
测试方法:微量法
应用领域：用于科学研究、教学、分析检测中。
用途：科研实验
测定意义：
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。
测定原理：
NAD-MDH催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
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文献和实验脱氢酶的酶蛋白，只能与 NAD 结合，组成乳酸脱氢酶，使底物乳酸发生脱氢反应。但可以与 NAD 结合的酶蛋白则有很多种，如乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶（ malate dehydrogenase ， MDH ）及磷酸甘油脱氢酶（ glycerophosphate dehydrogenase ， GDH ）中都含 NAD ，能分别催化乳酸、苹果酸及磷酸甘油发生脱氢反应。由此也可看出， 酶蛋白决定了反应底物的种类，即决定该酶的专一性，而辅酶（基）决定底物的反应类型。 （二
酸和苹果酸脱氢酶（MDH）反应，生成苹果酸，同时将NADH氧化成NAD+；在340n波长处吸光度的降低与样品中HCO3-含量成正比。反应式如下：~ 2标本采集与处理： 21受者准备：病人应处于安静、呼吸稳定的状态，穿刺时应尽量减少病人的疼痛感。坐位与卧位、睡眠后与清醒时、运动后与进餐后都会产生不同的结果。 22静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，因此影响测定水平。故在采血前至少应静坐5in。一般从肘静脉取血，使用止血的时间不超过1in，穿刺
机制比较复杂，不仅需借助苹果酸、草酸乙酸的氧化还原，而且还要借助α酮酸与氨基酸之间的转换，才能使胞液中来的NADH的还原当量转移进入线粒体氧化，具体过程如图6－10。 图6-10 苹果酸-天冬氨酸穿梭� GOT：谷草转氨酸；MDH：苹果酸脱氢酶 当胞液中NADH浓度升高时，首先还原草酰乙酸成为苹果酸，此反应由苹果酸脱氢酶催化，胞液中增多的苹果酸可通过内膜上的二羧酸 载体 系统与线粒体内的α酮戊二酸交换；进入线粒体的苹果酸，经苹果酸脱氢酶
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