DNASE I REC., GRADE I 20KU

产品描述 一般说明 特性：双链特异性核酸内切酶需要二价阳离子才能发挥最大活性。 活性：根据Kunitz（+ 25°C； DNA为底物），为10,000U /瓶。 单位定义：一个单位是酶活性，在测定条件下，每分钟吸光度增加0.001。 它是一种双链特异性内切核酸酶，二需要价阳离子激发最大活性。 应用 •DNase I（重组，I级）可用于：在蛋白质分离过程中消除DN A [1] •染色质结构分析 •在样品制备过程中消除DNA [2] 特点和优点 内容物 冻干粉 单位定义 根据Kunitz，一个酶活力单位表示在测定条件下，在1ml中，导致260nm处的吸光度以0.001 / min的速率增加。体积活性是在0.1M乙酸钠，5 mM MgSO 4，pH 5.0条件下进行测定。 检测方法：将小牛胸腺DNA（100μg）与20至50U DNase I在+ 25°C下进行 探针。对260nm处吸光度的增加进行测定。 信息说明：由于Kunitz检测具有高重复性和灵敏度，因此根据Kunitz结构检测，选择这些条件用于活性测定。将该当酶用于正常实验目的时，公司罗氏建议使用适合特定应用的孵育缓冲液，例如，在标准文献中所提到的缓冲液的（Sambrook 等，Curr.Prot.Mol.Biol。等）。 准备说明 活化剂：该酶需要二价阳离子才能发挥最大活性。反应的特异性取决于所用阳离子的性质。在存在Mg 2+ DNase I 的情况下，会在dsDNA中引起单链缺口，而在存在Mn 2+的情况下，酶会产生双链断裂。 储存条件（工作溶液）：溶解酶的长期储存 DNase I通常推荐的溶剂是水。当DNase I在水中重构时，该溶液可以在2至8°C下保存2天，并在-15至-20°C下保存1个月。为了获得最佳结果，请准备适当的等分试样，并避免反复冷冻和解冻。但是，要长期保存，请小心地将DNase I溶解在下面列出的一种缓冲液中。在缓冲液1中，酶将稳定数周。如果将其溶解在缓冲液2、3或4中并在建议的温度下储存，则该酶至少可以稳定18个月。 信息说明：溶解时请勿涡旋酶！ 缓冲器1为：20mM Tris-HCL，20毫摩尔MgCl 2，5mM的氯化钙2，0.1 mM二硫赤藓糖醇，0.1 mM EDTA，50％（v / v）甘油，pH8。将该溶液储存在-15至-25°C；它不会在此温度下冻结，并且会稳定几个星期。 缓冲液2：20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，1 mM二硫赤藓糖醇，100μg/ mL BSA，50％甘油（v / v），pH 7.6。将此溶液在-15至-25°C下储存最多18个月；在此温度下它不会冻结。 缓冲器3为：20mM的Tris-HCl，1毫摩尔MgCl 2，50％（W / V）甘油，pH 7.5。将此溶液在-15至-25°C下储存最多18个月；在此温度下它不会冻结。 缓冲液4：20mM Tris-HCl，1mM MgCl 2，pH 7.5。等量的等分试样（例如，10μl），将等分试样在干冰上快速冷冻，并在-60°C或更低的温度下保存长达18个月。解冻每个实验所需的量。不要重新冻结。丢弃所有剩余的解冻溶液。 其他注意事项 仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。