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- 百奥莱博
- BTN100101-VWG
- 北京
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
367
- 英文名：
Ni-Agarose Resin
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
- 规格：
2mL
特别提示：包括镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶)
英文名称：Ni-Agarose Resin
产品货号：BTN100101
产品规格：2mL
本产品就是专门用于纯化带有His标记的蛋白质实验。基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要方法，其原理是用基因重组的方法使待纯化蛋白的N 端或C 端携带一段His序列(一般是6个His)，然后利用偶联了Ni离子的琼脂糖与His的亲和作用而将His-标记蛋白与其他蛋白质分开，与Ni-琼脂糖结合的蛋白最后用咪唑溶液洗脱即可。Ni-琼脂糖中的Ni与蛋白质中His 结合示意图如下：
产品特点：
1．即开即用，非常方便。
2．介质为交联的琼脂糖，可以反复使用。
3．Ni偶联牢固，含有5个Ni 螯合位点，Ni密度达到20-40μmol/mL。
4．结合量大，每mL介质可以结合20-30mg的蛋白质。
5．专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
6．有效pH范围广，在pH3-10之间均可使用。
储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
相关参数：
| 特点 | 基团密度高,载量大,分辨率高,使用方便 |
| 基质 | 6%的交联琼脂糖凝胶 |
| 配体 | Ni2+ |
| 配体密度 | 20-40 umol/ml |
| 吸附载量 | 20-30mg蛋白/ml |
| 介质颗粒大小 | 45～165um |
| 最大流速 | 300cm/h |
| PH范围 | 3～10，在位清洗时pH范围可到2～11 |
| 保存温度 | 2～8℃ |
| 保存液体 | 20%乙醇 |
我公司销售的镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶)优惠促销，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验今天为大家带来镍柱的保养和清洗建议。 Ni柱的使用与保养 1. 对于一般的预装柱（Crude系列除外），上样前，样品需要使用0.22μm/0.45μm滤膜进行过滤或者离心处理，以避免样品中有细胞碎片等固体物质，堵塞柱子。 2. 如果细胞裂解后非常粘稠，需考虑是否因为DNA、RNA这类核酸物质过多，需要加入核酸酶去除，以降低样品粘稠度，提高上样速度及洗脱效果。 3. 柱子使用过程中，不能超过填料的压力，以免填料被压塌。 4. 每次使用后，可使用5-10倍柱体积的纯水或者结合缓冲
的影响，所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍：使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80％的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
到纯化的问题，大大简化了纯化的步骤，但还是会遇到些实际的问题，所以需要详细阅读使用说明和注意事项。(一)HIS 标签重组蛋白可以很方便用镍琼脂糖凝胶FF 分离，色谱填料已经螯合好了镍离子，使用非常方便，吸附载量更高，特异性更强，可以选择多种洗脱方式，是纯化这类融合蛋白的最佳工具。(二)ST 融合蛋白在表达时同时表达了谷胱甘肽s 转酶，很方便用GST 琼脂糖凝胶FF 分离，然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。而凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF 或苯甲脒琼脂糖凝胶FF 分离。(三)白A 融合
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