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- 2025年12月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
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42
- 英文名：
7-amino-actinomycin D
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
1mg
英文名称：7-amino-actinomycin D
产品规格：1mg
发货周期：1～3天
本产品适用于细胞核酸染色，可应用于荧光显微镜、激光共聚焦计或流式细胞仪检测。7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD标记DNA的强弱，将细胞分为三群：7-AAD强为死亡细胞，7-AAD弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD同PI有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品，可与Annexin V-EGFP/FITC/PE联合使用。
注意事项
1. 7-AAD 避光保存及使用。
2. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
操作说明
1.超纯水可配制1mg/ml 的7-AAD 储液，避光，2-8℃保存。
2.7-AAD 的工作浓度建议为2ug/ml，可根据实验进行微调优化。
3.荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD 荧光信号呈红色。
储存：-20℃,避光，有效期12个月。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
死细胞核7-AAD染料使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
激肽释放酶14抗体英文全称GDNF family receptor alpha-like英文简称GFRAL检测范围5965nmol/L-1600pg/mL
钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员7抗体英文全称uOC英文简称uOC检测范围5966nmol/L-8ng/mL
钾离子通道蛋白EAG1抗体英文全称EBV-Ab英文简称EBV-Ab检测范围5967nmol/L-400ng/mL
Ki67蛋白抗体英文全称apoprotein C1英文简称apo-C1检测范围5968nmol/L-800ug/ml
ATP敏感性钾通道亚基kir6.2抗体英文全称CD1A英文简称CD1a检测范围5969nmol/L-8ng/ml
G蛋白偶联受体54抗体英文全称aconitase英文简称aconitase检测范围5970nmol/L-400U/L
驱动蛋白家族KIF17抗体英文全称17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3英文简称HSD17b3检测范围5971nmol/L-20ng/mL
转录因子KLF9抗体英文全称EGR4英文简称EGR4检测范围5972nmol/L-4000pg/mL
KLF样转录因子8抗体英文全称rat ED-1英文简称rat ED-1检测范围5973nmol/L-48ng/mL
胞质接头蛋白Keap1抗体英文全称undercarboxylated matrix Gla protein英文简称ucMGP检测范围5974nmol/L-200ng/ml
钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体英文全称HMGR英文简称HMGR检测范围5975nmol/L-20ng/mL
离子通道蛋白Kv1.3抗体英文全称Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class F protein英文简称PIGF检测范围5976nmol/L-2000pg/mL
磷酸化KLF5抗体英文全称Cytoglobin英文简称CYGB检测范围5977nmol/L-48ng/mL
肺Kruppel样因子抗体英文全称CK-BB英文简称CK-BB检测范围5978nmol/L-800U/L
ATP敏感钾离子通道蛋白抗体英文全称apoA1P英文简称apoA1P检测范围5979nmol/L-32ng/mL
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2（rDNA）MAP1B rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse, Rat测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
古细菌+真细菌种属鉴定 PCR Mix 3（rDNA）MAP1A rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
枯草杆菌 PCR Mix 4（SSU）NDUFAB1 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human, Mouse测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
高GC革氏阳性细菌 PCR Mix 5（RPB1）STRA6 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, IHC包装:100 ul
链霉菌 PCR Mix 6（RPB2）EXOSC9 rabbit polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:ELISA, WB, IHC包装:100 ul
死细胞核7-AAD染料人虹膜色素上皮细胞裂解物 英文名称：HIPEpiCL请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
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人滋养层绒毛细胞裂解物 英文名称：HVTL请询价1 x 10^6 cells/T25培养瓶细胞系
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文献和实验Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
细胞术是通过检测不同荧光染料发射光谱来判断细胞是否发生凋亡。 由于光的发射波长不是一个具体值而是一个范围，所以会存在发射光谱「重叠」的现象，此时单个通道内可能检测出多个荧光基团的荧光从而造成「假阳性」现象，因此必须通过补偿进行修正，以确保所检测的荧光来自单一的荧光染料。 举个例子：PE 和 FITC 这两个通道是检测细胞凋亡时经常使用的通道，我们就拿这个作为例子说明为什么需要调节补偿。 如下图所示，浅绿色和浅黄色部分分别代表 FITC 和 PE 发射波长范围，深绿色和深黄
，然后第二天用 NucView 550 (Biotium) 施用不同浓度的星形孢菌素（STS）。NucView 550 是 caspase-3 荧光探针，死细胞核用红色荧光染色。用 STS 和 NucView 550 处理后，将 HT-29 微球用 4% 多聚甲醛固定并用 0.5%Triton X-100 / PBS（-）通透性处理。微球的细胞核在 4°C（39.2°F）下用 Hoechst 33342 过夜染色。染色后，用 SCALEVIEW-S4 将微球透明化。 成像和分析 我们使用 FV
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