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57
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
250ml×3
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中文名称:快速瑞氏染液
英文名称:
产品规格:250ml×3
发货周期:1~3天
瑞氏染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。
操作步骤
1. (选做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室温固定15-30 分钟。
2. 吸去固定液,室温通风晾干。
3. 将试剂一滴加到载玻片上,均匀覆盖住载片上血细胞,染色时间约为1 分钟。等染液有变红的趋势时,迅速滴加两倍试剂一的量的试剂二。继续染色5 到8 分钟。
4. 小股水流洗片,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。30s 水洗结束后将载片放到阴凉处风干。
5. 显微镜镜检。
染色结果
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
注意事项
1. 推片:取全血3 微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面向前滑动,至血液铺完血膜为止。
2. 涂片时不要太厚也不要太薄,太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。
3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。
4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400 微升,试剂二是试剂一的1 倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。
5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1-3 分钟,直至红润为止。
6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3-5 秒。
储存:2~8℃,避光,有效期12个月。
快速瑞氏染液使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
肠型脂肪酸结合蛋白抗体英文全称Salusin Alpha英文简称SALa检测范围5575nmol/L-100pg/mL
γ干扰素诱导蛋白202抗体英文全称Salusin Beta英文简称SALb检测范围5576nmol/L-200pg/mL
整合素连接激酶-1抗体英文全称IL-2sRβ英文简称IL-2sRβ检测范围5577nmol/L-1000pg/mL
生长抑制因子基因1抗体英文全称Anti-Angiotensin II Type 2 Receptor英文简称Anti-MTUS1检测范围5578nmol/L-320ng/L
干扰素alpha 7蛋白抗体英文全称17β-Hydroxylase英文简称17α-Hydroxylase检测范围5579nmol/L-4000pg/mL
干扰素β抗体英文全称17,20 lyase deficiency英文简称17-OHD检测范围5580nmol/L-8ng/mL
小肠型脂肪酸结合蛋白抗体英文全称anti-phospholipase receptor A2 Receptor antibody英文简称Anti-PLA2R Ab检测范围5581nmol/L-
拟南芥IKI3抗体英文全称pro-brain natriuretic peptide英文简称pro-BNP检测范围5582nmol/L-2000pg/mL
胰岛素降解酶抗体英文全称phosphorylated epidermal growth factor receptor英文简称p-EGFR检测范围5583nmol/L-1000pg/mL
肿瘤细胞凋亡ASPP家族的另一个成员抗体英文全称ERBB receptor feedback inhibitor 1英文简称ERRFI1检测范围5584nmol/L-2000pg/mL
Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂抗体英文全称Interleukin 20英文简称IL-20检测范围5585nmol/L-1000pg/mL
非洲爪蟾IGC抗体英文全称Uricase英文简称Uricase检测范围5586nmol/L-800pg/mL
γ-干扰素/γ-IFN单克隆抗体英文全称Complement C1q英文简称C1q检测范围5587nmol/L-200ng/mL
干扰素-γ/IFN-γ抗体英文全称C5a anaphylatoxin chemotactic receptor英文简称C5AR检测范围5588nmol/L-4000pg/mL
胰岛素样生长因子I受体抗体英文全称Fas英文简称Fas检测范围5589nmol/L-12ng/mL
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2. 吸去固定液,室温通风晾干。
3. 将试剂一滴加到载玻片上,均匀覆盖住载片上血细胞,染色时间约为1 分钟。等染液有变红的趋势时,迅速滴加两倍试剂一的量的试剂二。继续染色5 到8 分钟。
4. 小股水流洗片,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。30s 水洗结束后将载片放到阴凉处风干。
5. 显微镜镜检。
染色结果
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
注意事项
1. 推片:取全血3 微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面向前滑动,至血液铺完血膜为止。
2. 涂片时不要太厚也不要太薄,太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。
3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。
4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400 微升,试剂二是试剂一的1 倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。
5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1-3 分钟,直至红润为止。
6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3-5 秒。
储存:2~8℃,避光,有效期12个月。
快速瑞氏染液使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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