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生物素标记dUTP溶液(0.25mM)

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  • 上海一研
  • EY-19300
  • 进口、国产
  • 2025年12月04日
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    • 英文名

      Biotin-11-dUTP

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      20μl

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    中文名称:生物素标记dUTP溶液(0.25mM)
    英文名称:Biotin-11-dUTP

    产品规格:20μl
    发货周期:1~3天
    TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况, 其原理是生物素(Biotin)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3′-OH末端,并可与连接辣根过氧化酶的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)特异结合,在辣根过氧化酶底物二氨基联(DAB)的存在下,产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3′-OH形成,很少能够被染色。
    二、试剂盒组份
    组份
    Cat:KFS433
    储存条件
    Biotin-11-dUTP
    20μl
    -20℃,避光,12个月
    储存条件:-20℃避光,有效期12个月


    产品细节图片1
    生物素标记dUTP溶液(0.25mM)使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
    甘氨酸受体β/GlyR β抗体英文全称Cytochrome P450 2d11英文简称cyp2d11检测范围4555nmol/L-80U/L

    生殖细胞核因子GCNF/维甲酸受体相关睾丸受体抗体英文全称Cytochrome P450 2d12英文简称cyp2d12检测范围4556nmol/L-100U/L
    G蛋白转录因子α2/Gα t2抗体英文全称Cytochrome P450 2c19英文简称cyp2c19检测范围4557nmol/L-64U/L
    脊髓性肌萎缩症蛋白SMA抗体英文全称HDM-IgG英文简称HDM-IgG检测范围4558nmol/L-200ng/mL
    转录因子Gli2抗体英文全称DERP1-IgG英文简称DERP1-IgG检测范围4559nmol/L-200ng/mL
    转录因子Gli3抗体英文全称C-C motif chemokine 6 英文简称CCL6检测范围4560nmol/L-3000pg/mL
    GLIS2蛋白抗体英文全称SERCA ATPase英文简称SERCA ATPase检测范围4561nmol/L-100mU/mL
    味觉受体蛋白家族10亚基5抗体英文全称DERP1-IgE英文简称DERP1-IgE检测范围4562nmol/L-160ng/mL
    血型糖蛋白δ抗体英文全称Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 1英文简称UBA1检测范围4563nmol/L-80U/L
    谷氨酸受体1抗体英文全称insulin-like growth factor binding protein 5英文简称IGFBP-5检测范围4564nmol/L-5000pg/mL
    GRC5蛋白抗体英文全称Procollagen Type IV英文简称PC IV检测范围4565nmol/L-80ng/mL
    肠和大脑特定同源蛋白1抗体英文全称Cluster of differentiation 200英文简称CD200检测范围4566nmol/L-2000pg/mL
    G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体英文全称coagulation factor ⅩⅢ英文简称FⅩⅢ检测范围4567nmol/L-1000pg/ml
    G蛋白偶联受体10抗体英文全称Neuron-specific enolase英文简称NSE检测范围4568nmol/L-48U/L
    β-葡萄糖脑苷脂酶抗体英文全称Glycoprotein Hormone Beta 5英文简称GPHB5检测范围4569nmol/L-3000pg/mL
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    • 抗体的生物素标记

      3. 用1 ml DMSO 溶解NHSB 1 mg。 4. 向1 ml 蛋白质溶液(即含蛋白质1 mg)加入120 μl NHSB溶液(即含NHSB 120 μg)。 5. 在室温下持续搅拌,保温2~4小时。 6. 加入9.6 μL1 mol/L NH4Cl (每25 μg NHSB 加1 μl),在室温下搅拌10分钟。 7. 在4℃,对PBS充分透析,以除去游离的生物素。 8. 将样品上1 ml 的分子筛柱,以PBS缓慢洗脱,收集1 ml/管,蛋白质在1~3 ml 之间洗下

    • 光敏生物素对探针的标记

      步骤   1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA(0.5-1μg/μl,溶解于水中 2. 避光条件下加等体积的光敏生物素醋酸盐并混匀。    3. 将装有反应液的离心管置于冰模中,暗室中在光标记灯下照射30分钟(灯距样品15cm)。 4. 加入无菌水至总体积为100μl 5. 加入100μl仲丁醇,混匀。10000rpm离心10min,去上层液,再加入仲丁醇,离心,使水相浓缩至30

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