EdU(可替代BrdU)(61135-33-9)(≥98%(HPLC))

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    • 英文名

      5-Ethynyl-2'-deoxyuridine

    • CAS号

      61135-33-9

    • 保质期

      2年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃干燥

    • 规格

      50mg|250mg

    特别提示:包括EdU(可替代BrdU)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:EdU(可替代BrdU)
    英文名称:5-Ethynyl-2"-deoxyuridine
    产品货号:KM0162
    产品规格:50mg|250mg

    EdU是BrdU(5-溴-2"-脱氧尿苷)的新型替代物,可直接检测活跃的DNA合成或细胞周期的S期合成。作为胸苷的核苷类似物,可插入细胞培养物或动物体内处于活跃合成期的细胞DNA,无明显毒性。EdU的检测基于高效的点击化学反应,是由I价铜离子催化的叠氮化物和炔烃化合物之间的反应过程。EdU含有炔烃基,可与含叠氮基团的荧光探针反应形成稳定的三唑环。

    借EdU的点击反应进行DNA检测的优势是非常显而易见的。含叠氮基团荧光探针的小分子量使得EdU能在温和条件插入DNA,这相反于BrdU为基础的反应,后者需要DNA变性(通常使用HCl,加热或DNase消化)促使BrdU暴露,从而被抗BrdU抗体检测到。因此,少了变性步骤的EdU反应流程快键方便,可得到高重复性的结果,并且能轻易的与相关抗体检测靶标包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等进行多重分析,通过流式细胞仪、荧光显微镜或高通量成像仪(HCS)来检测。

    主要参数:
    CAS NO:61135-33-9
    分子式:C11H12N2O5
    分子量:252.23g/mol
    纯度:≥98%(HPLC)
    外观:白色至类白色固体
    溶解性:溶于DMSO(20mg/ml),无水乙醇(~25mg/ml),PBS,pH 7.2(~10 mg/ml)
    保存:-20℃干燥保存,至少2年有效。

    常见问题分析:

    1.是否任何细胞型都能插入EdU?
    答:不是。细胞必须含嘧啶核苷酸补救合成途径(pyrimidine salvage pathway),没有该途径,EdU不能被磷酸化进而不能插入复制中的DNA。

    2.EdU储存液如何制备?
    答:体外细胞实验,取适量EdU(Mw:252.23)溶于DMSO或生理缓冲液配制10mM母液,按单次用量分装,置于≤-20℃冻存,1年稳定。

    3.如何进行EdU标记?
    起始实验建议测试一系列EdU浓度来确定最佳浓度。如果目前有进行基于BrdU的标记实验,可选择相似的浓度和标记时间作为起始EdU标记条件。更低量的EdU可能达到同BrdU的标记效果,最优浓度根据标记时间有所变化,原则上浓度越低,标记时间越长。
    对于细胞培养物——哺乳动物和植物细胞用0.1–10μMEdU孵育0.5-3h能达到相对理想的标记;
    对于活体动物——根据注射方式、给药次数和检测位置有所变化。参考相应文献进行优化调整。

    4.如何进行EdU检测?
    使用含叠氮基团的荧光探针如TAMRA azide,Alexa Fluor azide(包括Alexa fluor 488,555,594,647)等,在含有CuSO4的染色反应液中进行荧光染色。或者直接使用我司提供的EdU增殖检测试剂盒(成像或流式检测),含有所有检测组分,使用方便。

    注意事项:
    1.EdU是一种能插入DNA的核苷类似物,操作过程一定要注意防护,不要与皮肤直接接触。另需戴口罩避免粉尘吸入。
    2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    我公司销售的EdU(可替代BrdU)(61135-33-9)(≥98%(HPLC)),5-yǐ炔基-2"-脱氧尿苷质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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