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- JCXB2159
- 国内
- 2025年06月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
大量
- 英文名：
Tuner(DE3感受态细胞
菌株类型: E.coli
培养基: LB培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
基因型: Tuner(DE3)感受态细胞基因型
抗 性: 无抗
质粒转化条件: 42 ℃热激
应 用: 蛋白表达
诱导方法: IPTG
菌株特点:
Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株，这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。
不像乳糖或者阿拉伯糖，IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用，可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下，目的蛋白可能会具有更的可溶性和生理活 性。
Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节，具有严格的浓度依赖性。
Tuner系列菌株还是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。
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文献和实验（ DE3 ）表达的活性蛋白比其它宿主菌高 10 倍以上。 Origami 宿主菌与氨苄抗性质粒相容，可用于 pET-32 载体，硫氧还蛋白标签能够进一步增强在胞浆内形成二硫键。 TrxB 和 gor 突变可分别用卡那霉素和四环素选择，因此该菌株建议用于带氨苄抗性标记 bla 的 pET 质粒。 Origami B 宿主菌来源于 BL21 lacZY 突变株，还带有与原始 Origami 菌株相同的 TrxB / gor 突变。 Origami B 菌株集 BL21 、 Tuner
本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
High Level Expression of Recombinant Proteins in E. coli
) plus pRARE Tuner(DE3) lacZY deletion mutant ADA494(DE3) trxB mutant Origami(DE3) trxB and gor mutations Expression Plasmid Elements Origin of Replication (ColE1) Selectable marker (ampicillin, kanamycin or chloramphenicol resistance)
