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- gelatins
- JCXB2156
- 国内
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
大量
- 英文名：
TOP10F′感受态细胞
菌种类型: E.coli
产品规格: 10X100 微升
转化效率: 〉1X10的9次方
基因型: TOP10F′感受态细
胞基因型
抗 性: 四环素
质粒转化条件: 42 ℃热激
生长条件: 37 ℃, 有氧
用 途: 克隆宿主菌，用于质粒扩增、筛选重组质粒。
菌株特点:
TOP10F´菌株含有F´附加体和lacIq，用于蓝白斑筛选时要向培养基中加入IPTG。
尤其适合TOPO克隆技术和零背景克隆技术，和扩增含Zeocin抗性的载体。
适用范围较广，在多种克隆手段中均可应用。
感受态制备方法:
采用新的二价锰法，Ultra
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文献和实验4℃，14000r/m离心10min。 7.12 弃上清，空气中干燥。 7.13 10μl H2O悬浮细胞。8、转化（要求：4℃预冷） 8.1 冰上融化感受态细胞（感受态细胞的制备见分子克隆啦）Top10f’。 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中，枪头轻轻吹打混匀。 8.3 冰上孵育30min。 8.4 42℃，45S～50S。 8.5 冰上孵育2min后，加1ml LB。 8.6 37℃，1h，250r/m. 8.7 2500r/m
. 7.13 10μl H2O悬浮细胞. 8、转化(要求:4℃预冷) 8.1 冰上融化感受态细胞(感受态细胞的制备见分子克隆啦)Top10f’. 8.2 加100μl转化细胞到预冷的1.5ml离心管中,枪头轻轻吹打混匀. 8.3 冰上孵育30min. 8.4 42℃,45S～50S. 8.5 冰上孵育2min后,加1ml LB. 8.6 37℃,1h,250r/m. 8.7 2500r/m
1.5ml缓冲液B，彻底混匀； 30℃水浴孵育1h； 室温下2000g离心10min，去除上清液，菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中； 离心样品，去除上清液，轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中； 将所有转化液铺于选择性平板，于30℃孵育3～4天后，鉴定； 3、毕氏酵母电转化法 （1）E.coli TOP10F’感受态细胞的制备 取10ul TOP10F’菌液，接种于200ml LB液体培养基中活化培养，37℃，200 rpm，16～18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB
