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40
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Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
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详见说明书
- 供应商:
上海一研
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低温
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1000T
英文名称:Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
产品规格:1000T
发货周期:1~3天
本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针,通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞,包括贴壁细胞核某些组织,但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。
原理:在钙黄素AM 存在活细胞内时,其特点就是由于胞内无所不在的酯酶活性作用,由几乎无荧光、具有细胞膜透性的钙黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质(Ex/Em:495nm/520nm)。而对于受损的细胞膜来说,碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞,与核酸结合,荧光信号从而放大40 倍,产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞(Ex/Em:530nm/620nm)。
细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
酶相关蛋白/脑蛋白15抗体英文全称Alpha-Endorphin英文简称α-EP检测范围1630nmol/L-1000pg/mL
磷酸化接头蛋白CrkL抗体英文全称Growth-Regulated protein β英文简称GROβ;CXCL2;MIP-2检测范围1631nmol/L-1000pg/mL
细胞粘附分子3抗体英文全称Colletin-10英文简称Colletin-10检测范围1632nmol/L-20ng/mL
整合素相关蛋白CD47英文全称ubiquitin C-terminal hydrolase 42英文简称USP42检测范围1633nmol/L-2000pg/mL
钙结合蛋白D28K抗体英文全称Complement 1q receptor英文简称C1qR检测范围1634nmol/L-8ng/mL
泛素载体蛋白R2抗体英文全称Seizure 6-like protein英文简称SEZ6L检测范围1635nmol/L-40ng/mL
酶12抗体英文全称Follistatin Like Protein 1英文简称FSTL-1检测范围1636nmol/L-800ng/mL
胰辅脂酶抗体英文全称S100A12英文简称S100A12检测范围1637nmol/L-640ng/mL
猪瘟病毒抗体英文全称Proteasome Subunit Beta Type 5英文简称PSMb5检测范围1638nmol/L-20ng/mL
细胞色素c酶亚型2抗体英文全称C4 Binding Protein Alpha英文简称C4BPa检测范围1639nmol/L-10ng/mL
铜蓝蛋白抗体英文全称Actin-related protein 2/3 complex subunit 3英文简称ARPC3检测范围1640nmol/L-1600pg/mL
结缔组织生长因子样蛋白抗体英文全称peroxiredoxin 2英文简称PRDX2检测范围1641nmol/L-3000pg/mL
周期素G2抗体英文全称galactokinase1英文简称galactokinase1检测范围1642nmol/L-800IU/L
7号染色体开放阅读框69抗体英文全称Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1英文简称LTBP1检测范围1643nmol/L-10ng/mL
8号染色体开放阅读框K29抗体英文全称Cortisol receptor英文简称CR检测范围1644nmol/L-80ng/mL
信号转导因子和转录激活因子1 小鼠单克隆抗体(5H7)STAT1 Mouse Monoclonal Antibody(5H7)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
白介素8 小鼠单克隆抗体(8B1)IL-8 Mouse Monoclonal Antibody(8B1)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1 小鼠单克隆抗体(4D12)SGK1 Mouse Monoclonal Antibody(4D12)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
组蛋白去乙酰化酶1 小鼠单克隆抗体(4E1)HDAC1 Mouse Monoclonal Antibody(4E1)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
Caspase-3 小鼠单克隆抗体(4B8)Caspase-3 Mouse Monoclonal Antibody(4B8)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
丝氨酸/苏氨酸激酶AKT 小鼠单克隆抗体(10D6)AKT Mouse Monoclonal Antibody(10D6)700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒Semen sterculiae lychnophorae胖大海染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 6号染色体开放阅读框146抗体别 名 Chromosome 6 open reading frame 146; Hypothetical protein LOC222826; MGC43581; Uncharacterized protein C6orf146.研究领域 细胞生物 免疫学性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C6orf146亚 型 IgG
Rhizoma zingiberis preparatum炮姜染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 补体C5抗体别 名 Anaphylatoxin C5a analog; C3 and PZP-like alpha-2-macroglobulin domain-containing protein 4; C5; C5a; CO5_HUMAN; Complement C5 alpha'' chain; Complement C5; Complement component C5; CPAMD4.研究领域 细胞生物 免疫学 新陈代谢蛋白分子量 predicted molecular weight: 104/112kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C5
Herba eupatorii佩兰染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 5号染色体开放阅读框19抗体别 名 Chromosome 5 open reading frame 19; Receptor accessory protein 2; Receptor expression enhancing protein 2; Receptor expression-enhancing protein 2; REEP 2; REEP2; REEP2_HUMAN; SGC32445.研究领域 细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导 G蛋白信号蛋白分子量 predicted molecular weight: 28kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C5orf19
Folium eriobotryae枇杷叶染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 5号染色体开放阅读框24抗体别 名 Chromosome 5 open reading frame 24; FLJ37562; Hypothetical protein LOC134553.研究领域蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C5orf24
Rhizoma wenyujin concisum片姜黄染料法PCR鉴定试剂盒 中文名称 5号染色体开放阅读框42抗体别 名 Chromosome 5 open reading frame 42; FLJ13231; Hypothetical protein LOC65250; Transmembrane protein ENSP00000382582; Uncharacterized protein C5orf42; CE042_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学蛋白分子量 predicted molecular weight: 362kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C5ORF42
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文献和实验一、材料 1. Resazurin细胞活力检测试剂盒(Biotium,Inc.30025) 2. 细胞:在本试验中,使用了三种人类前列腺癌细胞系进行检测。 (1)DU145(ATCC,HTB-81)(2)PC3(ATCC,CRL-1435)(3)LNCap(ATCC,CRL-1740)二、仪器 1. SpectraPLUS酶标仪三、步骤 1. 标准曲线制备: (1)在96孔板中加入100 μL 培养基,然后接种适量细胞,贴壁细胞控制在40~10 000/孔
光显微镜观察,激光滤片为QB24,压制滤片为TB8,经显微镜观察,发绿色荧光。绿色荧光的是有活力的,而发红色荧光的是无活力的死细胞。4、统计活力。活力以有活力的细胞数占总观察细胞数的百分数表示。 细胞活力(%)=观察到的活细胞数/观察的总细胞数x100(二)染色法1、制备原生质体和细胞材料。2、配制0.005~0.001%的染料。如伊文思蓝、洋红、甲基蓝等。3、用染料处理数分钟,染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色。4、染色过的细胞材料,放在显微镜下观察。凡未染或染色及浅的细胞是有活力
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
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