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Caspase 8 活性检测试剂盒

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  • 上海一研
  • EY-19028
  • 进口、国产
  • 2025年11月21日
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    • 英文名

      Caspase 8 Activity Assay Kit

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海一研

    • 保存条件

      低温

    • 规格

      20次|100次

    中文名称:Caspase 8 活性检测试剂盒
    英文名称:Caspase 8 Activity Assay Kit

    产品规格:20次|100次
    发货周期:1~3天
    本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 8酶活性或纯化的caspase 8酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。
    Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也称FLICE、MACH或Mch5,有时被写作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活,形成一个由p18和p10组成的二聚体,进一步激活下游的caspase 4,caspase 6,caspase 9和caspase 10。
    Caspase 8活性检测试剂盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
    试剂盒中提供了caspase 8催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 8酶活性的标准品。
    试剂盒组分:
    裂解液——————8ml
    检测缓冲液——————8ml
    Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl
    pNA(10mM)——————200μl
    储存条件:-20℃。使用说明 
        1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。 
        2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。 
        3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物; 
        4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;   
        5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。  
        6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。

    产品细节图片1
    Caspase 8 活性检测试剂盒使用注意事项
    1. 微量试剂取用前请离心集液。
    2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
    3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
    4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
    5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
    6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
    7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
    中心体蛋白AZI1抗体英文全称Retinal dehydrogenase 1英文简称ALDH1A1检测范围475nmol/L-120ng/mL

    ADCK5蛋白抗体英文全称Heat Shock 70kDa Protein 12B英文简称HSPA12B检测范围476nmol/L-16ng/mL
    细胞分裂周期蛋白5抗体英文全称Heat Shock Protein 10英文简称HSP-10检测范围477nmol/L-2000pg/mL
    β淀粉样肽/Aβ42抗体英文全称Heat Shock Protein 72英文简称HSP-72检测范围478nmol/L-1600pg/mL
    ADCK4蛋白抗体英文全称S139英文简称S139检测范围479nmol/L-8ng/mL
    艾滋病病毒复制结合蛋白抗体英文全称Pregnancy Specific β1 Glycoprotein英文简称SP1;PSβ1-G检测范围480nmol/L-240μg/mL
    伴侣蛋白bc1同源复合体抗体英文全称lysosomal-associated membrane protein 2英文简称HLAMP-2检测范围481nmol/L-48ng/mL
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    心肌锚蛋白重复结构域1抗体英文全称orotatephos phoribosyltransferase英文简称OPRT检测范围483nmol/L-480pg/mL
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