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- 详细信息
- 文献和实验
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36
- 英文名:
Positive control preparation kit for TUNEL detection
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
10次
英文名称:Positive control preparation kit for TUNEL detection
产品规格:10次
发货周期:1~3天
本试剂盒可以用于TUNEL检测阳性对照的制备,制备后的阳性对照可以用于一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT135)的荧光,也可以用于显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT137)的显色检测。DNase I可以剪切基因组DNA,使基因组DNA产生片段化(fragmentation)。基因组被片段化的细胞在用TUNEL法检查时会呈阳性染色。本试剂盒足够制备10个阳性对照。
试剂盒组份:
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl
注意事项:需自备用于TUNEL检测的组织切片、或培养细胞的片子。需自备TUNEL检测试剂盒。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
TUNEL检测阳性对照制备试剂盒使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
血管紧张素III抗体英文全称Ureaplasma urealyticum antibody英文简称UU-Ab检测范围340nmol/L-40ng/mL
腺苷酸环化酶3抗体英文全称A Disintegrin And Metalloprotease 12英文简称ADAM12检测范围341nmol/L-16ng/mL
腺苷酸环化酶7抗体英文全称A Disintegrin And Metalloprotease 9英文简称ADAM9检测范围342nmol/L-800pg/mL
腺苷酸环化酶4抗体英文全称Staphylococcal Enterotoxin英文简称SE检测范围343nmol/L-80ng/mL
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗体英文全称Staphylococcal Enterotoxin A英文简称SEA检测范围344nmol/L-20ng/mL
芳香N-乙酰化转移酶抗体英文全称Staphylococal Protein A英文简称SPA检测范围345nmol/L-20ng/mL
腺苷酸环化酶8抗体英文全称staphylococcus aureus ent英文简称SE检测范围346nmol/L-16ng/mL
腺苷酸环化酶10抗体英文全称Neural Precursor Cell Expressed, Developmentally Down-Regulated 9英文简称NEDD9检测范围347nmol/L-200ng/mL
腺苷酸环化酶5抗体英文全称arginine vasopressin英文简称AVP检测范围348nmol/L-80pg/mL
腺苷酸环化酶6抗体英文全称sperm protein 17英文简称Sp17检测范围349nmol/L-64ng/mL
腺苷酸环化酶9抗体英文全称SPAG9英文简称SPAG9检测范围350nmol/L-80ng/mL
三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体英文全称macrophage-stimulating proteinα英文简称MSP-α检测范围351nmol/L-1600pg/mL
蛋白激酶A2抗体英文全称Macrophage Scavenger Receptor 1英文简称MSR1检测范围352nmol/L-16ng/mL
血管动蛋白抗体英文全称Macrophage Inflammatory Protein-1α英文简称MIP-1α检测范围353nmol/L-160pg/mL
血管紧张素Ⅱ受体2抗体英文全称Agrin英文简称Agrin检测范围354nmol/L-8ng/mL
磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基250克Phosphate Glucose Peptone Water用于甲基红试验
KORSER氏柠檬酸盐肉汤100克Korser Citrate Sodium Broth用于细菌的枸橼酸盐试验
结晶紫中性红胆盐琼脂250克VRBA用于大肠菌群的检验
SA琼脂250克Salmonella Arizona Agar亚利桑那沙门氏菌的选择性分离
叠氮钠葡萄糖肉汤250克Azide Dextrose Broth链球菌、肠球菌、粪链球菌的增菌培养
KF链球菌琼脂100克KF Streptococcus Agar链球菌的选择性分离和计数
TUNEL检测阳性对照制备试剂盒Catechu儿茶PCR鉴定试剂盒中文名称 三磷酸腺柠檬酸裂解酶抗体别 名 ACL; ATP citrate (pro-S) lyase; ATP citrate synthase; Citrate cleavage enzyme; EC 2.3.3.8; A730098H14RIK; ACLY; ATP CITRATE LYASE; ATPCL; AW538652; Cce; CITRATE LYASE; CLATP; MGC124629.研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 122kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATP citrate lyase
Rhizoma pinelliae preparatum法半夏PCR鉴定试剂盒 中文名称 蛋白激酶A2抗体别 名 A kinase (PRKA) anchor protein 2; A kinase anchor protein 2; AKAP 2; AKAP KL; AKAPKL; KIAA0920; PALM 2; PALM2; PRKA 2; PRKA2; Protein kinase A anchoring protein 2; Protein kinase A2; AKAP2_HUMAN.研究领域 细胞生物 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶蛋白分子量 predicted molecular weight: 95kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AKAP2
Folium sennae 番泻叶PCR鉴定试剂盒 中文名称 血管动蛋白抗体别 名 AMOT; AMOT_HUMAN; Angiomotin; Angiomotin p130 isoform; KIAA1071.研究领域 肿瘤 心血管 免疫学 信号转导 结合蛋白蛋白分子量 predicted molecular weight: 118kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Angiomotin (545-620aa)
Radix saposhnikoviae防风PCR鉴定试剂盒 中文名称 血管紧张素Ⅱ受体2抗体别 名 AGTR 2; AGTR2; AGTR-2; AGTR2_HUMAN; angiotensin II receptor type 2; Angiotensin II Type 2; Angiotensin II type-2 receptor; Angiotensin receptor 2; AT 2; AT2; AT2R2 ATGR 2; ATGR2; ATGR-2; MRX 88; MRX88; Type 2 angiotensin II receptor; Type-2 angiotensin II receptor.研究领域 心血管 细胞生物 信号转导 G蛋白偶联受体蛋白分子量 predicted molecular weight: 41kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human angiotensin II receptor type 2
Radix stephaniae tetrandrae防已PCR鉴定试剂盒 中文名称 ASH1蛋白抗体别 名 Absent small and homeotic disks protein 1 homolog; Absent Small or Homeotic Like; ASH 1; ASH 1L; ash1 (absent small or homeotic 1); Ash1 (absent small or homeotic) like; Absent small and homeotic disks protein 1 homolog; ASH1-like protein; ASH-1L; ASH1L_HUMAN; ASH1L1; huASH1; Lysine N-methyltransferase 2H; Probable histone-lysine N-methyltransferase ASH1L.研究领域 细胞生物 神经生物学 表观遗传学蛋白分子量 predicted molecular weight: 327kDa性 状 Lyophilized or Liquid免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASH1L
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文献和实验:一个试剂盒 50T 试剂盒存储/稳定性:未开封试剂盒储存于-15~-25℃可稳定至标签上标明的效期。 试剂 TUNEL 反应混合物 转化-POD 储存和稳定性 TUNEL 反应混合物应在用前临时配制,不能储存 TUNEL 反应混合物用前应置于冰上 一旦融化转化-POD 溶液后,应储存于 2-8℃(最长稳定 6 个 月) 注意:禁止冰冻结冰 优点: 优点 灵敏 特异 快速 简便 灵活 特点 在单个细胞水平检测细胞凋亡的早期间断 对坏死来说,优先标记凋亡 分析
c,用-20度预冷的丙酮冷冻固定10分钟 d,PBS清洗 10minX2 e,用新鲜配制的通透液(含0.1%的Triton X-100和0.1%的柠檬酸钠溶液) 室温通透15min。 f,PBS清洗 10minX2 g. 阳性对照组加入DNase I 40ul(1u/ul),37度孵育15min h. PBS清洗 10minX2 i. Roehe试剂盒中的的TUNEL反应缓冲液(含FITC标记的dUTP)和脱氧核糖 核酸末端
的试剂盒,并且严格的设立对照。经过预实验方法稳定后再进行大规模实验。标本处理后,均可以用荧光纤维镜进行观察,拍照。流式检测后,可以进行精确的计算凋亡百分比。这一点,经典TUNEl是做不到的。
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