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AD494(DE3)pLysS感受态细胞

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      AD494(DE3)pLysS感受态细胞

    细胞名称:    AD494(DE3)pLysS
    菌株类型:    E.coli
    培养基:    LB培养基
    生长条件:    37 ℃,  有氧
    基因型:    AD494(DE3)pLysS感受态细胞基因型
    抗   性:     卡那霉素和氯霉素
    质粒转化条件:    42 ℃热激
    应    用:    蛋白表达
    诱导方法:    IPTG

    菌株特点:    
    AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。

    AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构。

    AD494菌株中的thioredoxin reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨苄或者其他非卡那霉素抗性的质粒,进行基因蛋白表达。

    DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。能够利用IPTG直接进行蛋白的诱导表达。

    含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

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    • 各种感受态细胞的区别、用途和特征

      )ply菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3pLysS(cmR). 特点: 该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性.此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达. 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达. 用途: 蛋白质表达.

    • 各种感受态细胞的区别 用途 特征

      ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR)。 特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。 适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。 用途:蛋白质表达 DH5α菌株 基因型:F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96

    • 如何阅读质粒图谱

      产生少量溶菌酶,而 pLysE 宿主菌产生更大量酶。这些菌株用于在诱导前抑制 T7 RNA 聚合酶的基础表达,这样可以稳定编码影响细胞生长和活力的目标蛋白的 pET 重组体。带有 pLacI 的宿主菌产生额外的抑制 pETBlue 和 pTriEx 载体基础表达的 lac 阻遏蛋白。 λ DE3 溶原化试剂盒用于制备其它遗传背景的新表达宿主菌。 AD494 菌株为硫氧还蛋白还原酶 ( trxB ) 突变菌株,能够在胞浆内形成二硫键,提供了生产正确折迭的活性蛋白的潜力。 TrxB 突变可用

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