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- 晶抗生物
- JK-R2897
- 国内
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
大量
- 英文名：
小鼠脉胳膜成纤维细胞
种属来源: 小鼠
组织来源: 实验动物的正常眼组织
疾病特征: 正常原代细胞
细胞形态: 长梭形细胞，不规则细胞
生长特性: 贴壁生长
培 养 基: 小鼠脉胳膜成纤维细胞推荐使用EliteCell原代成纤维细胞培养体系
作为体外培养原代脉络膜成纤维细胞的培养基。
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
传代方法: 1：2至1：6，每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
细胞鉴定: 波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度高于90%。
QC检 测: 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
特点和简介
脉络膜新生血管(choroidal neovascularization，CNV)已成为眼科学领域的研究热点之一，在血管外侧有结缔组织，结缔组织是由成纤维细胞构成，起到支持和保护作用。
接受后处理
1) 收到小鼠脉胳膜成纤维细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，小鼠脉胳膜成纤维细胞责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
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文献和实验Perfusion Kit, mouse and rat，130-128-030） 搭配gentleMACS Octo八通道带加热全自动组织解离器使用。 7. 如何得到心肌细胞？ 小鼠心脏由多种类型细胞构成，包括心肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞、免疫细胞、平滑肌细胞等。其中心肌细胞通过闰盘紧密连接，需要较强的酶解，但细胞膜脆弱，很容易在解离过程中破裂而造成细胞死亡。尤其是成年小鼠心肌细胞，体积大且不规则，更加大分离难度。 对于新生小鼠，闰盘未完全成熟，细胞连接没有十分紧密，可以使用常规解离方法，但可能出现得率
细胞多起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等。例如，来源于人类胚肾的HEK293细胞，来源于人类肝脏组织的HEPG2细胞，来源于人类子宫颈的Hela细胞就属此类。 成纤维细胞型 胞体多呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形细胞核，呈放射状生长。除真正的成纤维细胞外，起源于中胚层间充质的组织的心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等均呈本型形态。另外，也常将一些与成纤维细胞形态类似的培养细胞归为此类。常见的成纤维性细胞如源自小鼠
)：C57BL/6和C57BL/10；易感染的品系(显现临床症状)：BALB/c、DBA/2、CBA和C3H。临床症状：可呈现急性、亚急性、慢性或隐性等型。包括面部水肿，皮下丘疹，脚，脸，耳和尾巴皮肤靡烂，或者是四肢和尾巴坏死腐脱。急性会死亡。控制：1. 对引进的小鼠和小鼠组织作隔离及检测。2. 消除感染的小鼠和组织，以及消除房舍内的污染。3. 停止繁殖，怀孕期间子宫内的感染，导致剖腹产可能无法完全避免污染。(五) 淋巴球性脑膜脉胳膜炎病病Lymphocytic Choriomeningitis
