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北京百奥莱博科技有限公司
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产品名称:兔抗牛IgG(抗血清)
产品货号:CYB162046
产品规格:0.5ml
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文献和实验首先用硫酸铵或硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白,再进一步纯化,常用的方法有: 1.离子交换层析法:离子交换剂有DEAE纤维素和QAE纤维素。 2.凝胶过滤医学教育|网搜集整理:通过多孔凝胶介质达到分离目的。 3.亲和层析法:采用纯化抗原或粗提抗原交联的sepharose4B的层析柱来制备。 4.酶解法【如制备F(ab‘)2】:片段用胃蛋白酶水解制备。
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白,辛酸为短链脂肪酸,在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质;第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来,操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清(兔抗鸡血清)。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液:60mmol/L,pH
单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。有时免疫原不纯,含有微量的杂抗原(性质相近的),制得的抗血清中出现2~3种杂抗体。即使用纯抗原,例如用高度纯化的IgG免疫动物,出现的抗体总是有抗γ重链的抗体,也有抗κ轻链和抗λ轻链的抗体。还有一种情况,有些蛋白质和其他蛋白质处于一种结合状态,如甲胎蛋白常和白蛋白相结合,因此免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白杂抗体存在。 一、除去杂抗体有两种方法 1.亲和层析法将交叉杂抗原交联到琼脂糖珠4B上,如除去抗白蛋白抗体,则交联上白蛋白或不含甲胎
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