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- 钰博生物
- YB001A
- 中国/上海
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hipro DNA Assembly Cloning kit
- 保质期：
二年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
25rxn/50rxn
产品概述
Hipro DNA组装克隆试剂盒可以高效、准确的组装DNA片段，从而实现简单快速的无缝克隆。该产品可以在一管内，恒温条件下，有效的连接多个带有重叠序列的片段，广泛应用于基因的快速定向克隆，实验过程涉及的反应机理如下：
（1） 利用外切酶活性产生单链3‘ 突出端，促使互补的末端重叠序列（15-20 bp）退火；
（2） 互补末端一旦退火完成，聚合酶活性会沿3‘延伸填补退火片段的缺口；
（3） 缺口补平后，利用DNA连接酶的连接酶活性完成DNA切刻处的修复，形成完整的重组载体。
整个过程只需在50℃下反应5-15 min即可完成，一次反应可兼容1~5个片段的同源重组，内含高保真DNA聚合酶和高保真DNA连接酶可确保重组准确进行，连接产物可进行多种化学感受态大肠杆菌的转化，阳性率接近100%。
产品内容
| 组分 | YB001A | YB001B |
| Hipro DNA Assembly Mix | 125 μL | 250 μL |
| pDA-Zero vector，linearied（50 ng/μL） | 25 μL | 50 μL |
| 500bp control insert（20 ng/μL） | 5 μL | 10 μL |
产品优势
快速：5 ~15min即可完成连接反应。
兼容性强：可完成1~5片段的同源重组。
方便快捷：2×预混液包装，减少加样次数，使得克隆更为高效。
实验案例
1.单片段同源重组
以线性化的pDA-Zero vector、与2× PfuMax HiFi PCR ProMix（英赞，P216）扩增所得0.5kb DNA片段作为同源重组的底物，用Hipro DNA Assembly Mix进行50℃，5min快速同源重组后，转化到DH5α感受态细胞，培养12-16 h后，平板菌落生长状况如图1所示，随机挑取30颗单克隆用载体通用引物进行菌落PCR，后进行琼脂糖凝胶检测，如图4所示，分析上述结果可得，Hipro DNA Assembly Mix具有优异的重组效率和阳性率。
2.多片段同源重组
以线性化的pET-28a载体、与2× PfuMax HiFi PCR ProMix（英赞，P216）扩增所得0.5 kb 、1.0 kb、2.0 kb DNA片段作为同源重组的底物，用Hipro DNA Assembly Mix进行50℃，15min快速同源重组后，转化到DH5α感受态细胞，培养12-16 h后，平板菌落生长状况如图3所示，随机挑取28颗单克隆用载体通用引物进行菌落PCR，后进行琼脂糖凝胶检测，如图4所示，分析上述结果可得，Hipro DNA Assembly Mix具有优异的重组效率和阳性率。
应用范围
单片段同源重组，多片段同源重组，快速克隆
产品存储
-20℃保存
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