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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研生
- 库存:
47
- 英文名:
详见说明书
公司优势:
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
资源名称 SK-NEP-1
种属 人肾母细胞瘤细胞
类型 肾,肋膜渗出液
形态 圆形悬浮
培养方法
培养基 McCOY's 5A(SIGMA,货号M4892,添加NaHCO3 2.2g/L),85%;优质胎牛血清,15%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
生长特性 半贴壁生长
详细说明
动物种别 人
性别 女
描述 超微结构有少许微绒毛,连接复合物,形态完整的高尔基体,内质网多为光滑型,脂滴,没有病毒棵粒。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。
细胞培养的优点:
1.SK-NEP-1研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
2,3,5,4-四羟二-2-O-β-D-葡萄糖苷进口/国产WDR19 WD重复膜蛋白19体含量测定
英文名称标准品人状(T4)ELISA Kit,48T/96T 200mg
BOLA1英文名称:AER61兔子透明质(HA)免疫试剂盒
牛磺鹅去胆钠进口/国产WSB2/WD SOCS box protein 2 信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2体鉴别 HPLC≥98%CD8分子检测试盒20mgNAM
英文名称标准品小鼠状(T4)ELISA Kit,48T/96T 25mg
BOLA2英文名称:FE65兔子肽聚糖(PG)免疫试剂盒
HPLC≥98%CD82分子检测试盒20mgTB-Ab IgM
英文名称标准品大鼠状(T4)ELISA Kit,48T/96T 25mg
LIFR/CD118 peptide英文名称:SIM1异染色质蛋白1磷化抗体(果蝇)
SK-NEP-1USP级,1:2500;2500USPu/mg(BAEE1万u/mg)98%5gPBG
Phospho-MSK1 (Ser376) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 肿瘤/丸原81体
Phospho-Tuberin (Ser1387)英文名称:Raptor微管相关末端结合蛋白2抗体
BR;1:25098%100gUrogen Ⅲ
Phospho-MSK1(Thr581) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产ARSA 芳香硫酯酶1体
Phospho-Tuberin(Ser939)英文名称:Phospho-Raptor (Ser792)减数分裂内切酶EME1抗体
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Flos chrysanthemi菊花PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Semen citri reticulatae橘核PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Semen cassiae决明子PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
BR;1:25097%25gCoprogen Ⅲ
MST1 蛋白激酶MST体进口/国产ATE1 tRNA的蛋白转移酶1体
Phospho-Tuberin(Tyr1571)英文名称:phospho-c-Raf (Ser289)延伸突触蛋白2抗体
收到SK-NEP-1如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
1.具有多年的销售经验和资深的行业背景,我司秉承质量优先的理念,重视自主创新,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
资源名称 SK-NEP-1
种属 人肾母细胞瘤细胞
类型 肾,肋膜渗出液
形态 圆形悬浮
培养方法
培养基 McCOY's 5A(SIGMA,货号M4892,添加NaHCO3 2.2g/L),85%;优质胎牛血清,15%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
生长特性 半贴壁生长
详细说明
动物种别 人
性别 女
描述 超微结构有少许微绒毛,连接复合物,形态完整的高尔基体,内质网多为光滑型,脂滴,没有病毒棵粒。 在本库通过支原体检测。 在本库通过STR检测。
细胞培养的优点:
1.SK-NEP-1研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
2,3,5,4-四羟二-2-O-β-D-葡萄糖苷进口/国产WDR19 WD重复膜蛋白19体含量测定
英文名称标准品人状(T4)ELISA Kit,48T/96T 200mg
BOLA1英文名称:AER61兔子透明质(HA)免疫试剂盒
牛磺鹅去胆钠进口/国产WSB2/WD SOCS box protein 2 信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2体鉴别 HPLC≥98%CD8分子检测试盒20mgNAM
英文名称标准品小鼠状(T4)ELISA Kit,48T/96T 25mg
BOLA2英文名称:FE65兔子肽聚糖(PG)免疫试剂盒
HPLC≥98%CD82分子检测试盒20mgTB-Ab IgM
英文名称标准品大鼠状(T4)ELISA Kit,48T/96T 25mg
LIFR/CD118 peptide英文名称:SIM1异染色质蛋白1磷化抗体(果蝇)
SK-NEP-1USP级,1:2500;2500USPu/mg(BAEE1万u/mg)98%5gPBG
Phospho-MSK1 (Ser376) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产ARMC3 (Cancer/testis antigen 81) 肿瘤/丸原81体
Phospho-Tuberin (Ser1387)英文名称:Raptor微管相关末端结合蛋白2抗体
BR;1:25098%100gUrogen Ⅲ
Phospho-MSK1(Thr581) 化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产ARSA 芳香硫酯酶1体
Phospho-Tuberin(Ser939)英文名称:Phospho-Raptor (Ser792)减数分裂内切酶EME1抗体
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Flos chrysanthemi菊花PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Semen citri reticulatae橘核PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次 Semen cassiae决明子PCR鉴定试剂盒 负20度 一年 2-4周 低温
BR;1:25097%25gCoprogen Ⅲ
MST1 蛋白激酶MST体进口/国产ATE1 tRNA的蛋白转移酶1体
Phospho-Tuberin(Tyr1571)英文名称:phospho-c-Raf (Ser289)延伸突触蛋白2抗体
收到SK-NEP-1如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
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文献和实验相关实验
血小板聚集,肝素和口服抗凝剂能抑制凝血机能。尿激酶(UK)和链激酶(SK)等可进促纤溶功能。口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能、纤维蛋白原、凝血酶原以及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ因子活性明显升高。剧烈运动和月经期纤溶活性明显升高,高脂肪食物造成血脂升高可抑制纤溶活性。吸烟可使血小板聚集性明显升高。饮酒可抑制血小板聚集性。剧烈运动或输注肾上腺素时,Ⅷ因子活性会快速上升。 因此,当出现一些意想不到的结果时,应考虑是否有以上因素的影响。 二、标本的采集 1.确认病人的姓名
克利德等药物能抑制血小板聚集,肝素和口服抗凝剂能抑制凝血机能。尿激酶(UK)和链激酶(SK)等可进促纤溶功能。口服避孕药会使血小板粘附功能、血小板聚集功能、纤维蛋白原、凝血酶原以及凝血因子Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅻ因子活性明显升高。剧烈运动和月经期纤溶活性明显升高,高脂肪食物造成血脂升高可抑制纤溶活性。吸烟可使血小板聚集性明显升高。饮酒可抑制血小板聚集性。剧烈运动或输注肾上腺素时,Ⅷ因子活性会快速上升。 因此,当出现一些意想不到的结果时,应考虑是否有以上因素的影响。 二、标本的采集
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