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- 钰博生物
- YB3121
- 上海
- 2025年07月12日
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- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 库存：
大量
- 英文名：
No DMSO, no serum cell freeze.
- 运输方式：
冰袋运输，长时间储存于 2-8℃避光保存。有效期 2个月
- 规格：
100ml
产品简介：
化学成分确定、不含动物源成份，也不含DMSO的冻存液。
可以广泛地运用于各类细胞特别是干细胞的冻存。
批次间十分稳定。
可以维持干细胞的多潜能性，不影响干细胞的增殖和分化能力。
细胞复苏率达90%以上，复苏效果优于含血清冻存液。
无需程序降温，可直接放置于负80℃冰箱冻存。
使用说明：
细胞消化和计数，用胰酶对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数。
1000rpm/min离心5分钟，去掉上清。
根据细胞计数的情况，加入适量的细胞无血清冻存液，使细胞密度在1×106/ml左右（或根据自己希望达到的细胞密度）。
轻轻地重悬细胞（务必重悬均匀）,将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖。
将冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒直接放入负80℃。
第二天将细胞从负80℃转移到液氮中。
注意事项：
最好用处于对数生长期的细胞进行冻存。
控制好胰酶的消化时间，切记消化过度，会影响细胞复苏效果。
重悬细胞的过程中，请务必要轻柔，以免损伤细胞，但同时也一定要充分重悬，这样细胞在复苏时才不会成团。
细胞操作请注意无菌。
运输与储存：冰袋运输，2～8℃保存，有效期24个月。
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文献和实验科幻电影中将冻存若干年的生命体重新解冻复活的情节在生命科学研究过程中每一天都在上演。为了将每一种有生命的细胞较好的保存其原有的细胞特性或者长久的保存种质资源，实验人员往往将细胞用特殊配置的细胞冻存液保存于-196℃ 的液氮，使得细胞暂时脱离生长状态，等到实验需要的时候再从液氮中取出复苏应用。在这一看似神奇的生命存储过程中，我们不禁要问，这是如何实现的呢？ 其实，细胞冻存和复苏的教科书和实验手册上面都有。小编不想再重复了。这里，我要谈谈应该注意的一些事项和技巧，大部分都是血泪教训
人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
1-2mL 培养液后吹匀。 4、将细胞悬液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 注：第一次传代推荐传代比例为 1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。 下面 T25 瓶为例 1、细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗瓶底 1-2 次后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 2ml 完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2、1000RPM 离心 5 分钟去掉上清。用血清重悬浮，加 DMSO
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