■ 重组人干扰素α2a 蛋白含量测定国家标准品

蛋白标准品（Marker）知识汇总

的。 实验室常用的蛋白标准品多是来自NEB、MBI、GE、Bio-Rad 、Invitrogen、Novagen、Promega、MRESCO、Pierce Bio. 等品牌，生物帮2-D 蛋白 MW Markers产品推荐：Marker for 2D Electrophoresis 、ColorBurst(TM) Electrophoresis Marker 、Myoglobin, Carbamylated 2D Electrophoresis Marker from equine heart

操作篇：western blot 之蛋白含量测定

 WB 实验在提取完蛋白质后，就要对蛋白含量进行测定 测定方法如下： 一、制作标准曲线 1、从-20℃ 取出 1 mg/ml BSA，室温融化后，备用。 2、取 18 个 1.5 ml 离心管，3 个一组，分别标记为 0 μg，2.5 μg，5.0 μg ，10.0 μg ，20.0 μg ，40.0 μg。 3、按下表在各管中加入各种试剂。 4、混匀后，室温放置 2 min。在生物分光光度计上比色分析。 二、 检测

细菌胞外蛋白含量测定

Folin—酚试剂法（Lowry法）（一）实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。‚Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深兰色（钼