▲Vero 细胞 DNA 定量国家参考品（限杂交法）

关于疫苗中Vero传代细胞DNA残留检测技术

与B淋巴细胞融合，例如生产单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 由于肿瘤细胞或携带肿瘤基因的细胞具有致肿瘤的危险，所以该类细胞不能作为细胞基质用于疫苗生产；因此用于疫苗生产的细胞系均采用非肿瘤细胞系，即正常细胞群的连续传代后繁衍的细胞系，在一定传代限度内使用，目前使用的Vero细胞属于此类。Vero细胞由于具有传代细胞特性，因此也存在理论上的潜在致肿瘤性。目前WHO认为130～150代细胞无致肿瘤性，可以用于疫苗的生产。目前国内研制的Vero细胞基质的疫苗，细胞致肿瘤试验均为阴性，已批准上市多年的产品，未见有安全

vero（非洲绿猴肾细胞)的传代

传代步骤比较传统：倒掉培养液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培养基－>用吸管吹打均匀－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。我的体会是：1、消化时间和实验环境温度也有很大关系，我们实验室条件比较差，不能维持恒温（不过我想大部分实验室目前也还是做不到的）。夏天的时候，消化特别快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以，经验很重要，如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断，首先效率太低，而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶，当感觉到有些泛白，瓶角有少许细胞

vero（非洲绿猴肾cell)的传代

vero（非洲绿猴肾cell):贴壁细胞，以25ml小方瓶为例，培养液用的是MEM。 MEM的配制：10%小牛血清，1%双抗，3%谷氨酰胺，1~1.5%NaHCO3. 传代方法： 1、倒掉培养液，如果细胞脏的话可用PBS洗两次，否则不用。 2.、胰酶0.25%2ml消化1~3分钟，容易消化. 3、倒掉胰酶，加MEM9~12ml,将贴壁细胞摇至悬浮，并用吸管吹匀，一传三或一传四。 4、置37度，5%CO2孵箱。