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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉处,避光
- 英文名:
Bile Lactose Reference Medium ( BLRM )
- 供应商:
上海羽朵生物
- 规格:
3.6/100mL50 袋/盒
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文献和实验成分 蛋白胨 20g 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g 乳糖 10g 0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL 蒸馏水 1000mL pH7.4 制法 将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。 注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍
. 目的蛋白应该在30 kD,但分子量显示是36 kD左右(这个问题是个低级错误,接下来的帖子会指出)。原因分析:为什么阴性对照会有带?我想起表达毒性蛋白的protocol. 表达毒性蛋白的时候,由于DE3可能根本就不长,或者长得很慢,这时候我们会在培养基中加glucose。当培养基中有其他首选碳源,如glucose时,细菌会优先选择glucose,而glucose会抑制cAMP的活性从而关闭乳糖操纵子。为什么要加入glucose呢?我们用的DYT或者LB培养基中含有丰富的tryptone。后者可能
分析: 为什么阴性对照会有带?我想起表达毒性蛋白的protocol. 表达毒性蛋白的时候,由于DE3可能根本就不长,或者长得很慢,这时候我们会在培养基中加glucose。当培养基中有其他首选碳源,如glucose时,细菌会优先选择glucose,而glucose会抑制cAMP的活性从而关闭乳糖操纵子。 为什么要加入glucose呢?我们用的DYT或者LB培养基中含有丰富的tryptone。后者可能含有微量的乳糖。 所以虽然没有加IPTG,其中的lactose同样可能诱导蛋白的表达。这样毒性
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