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- JCXB926
- 国内
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
大量
- 英文名：
大鼠肺大动脉平滑肌细胞
种属来源: 大鼠
组织来源: 实验动物的正常肺动脉组织
疾病特征: 正常原代细胞
细胞形态: 长梭状细胞
生长特性: 贴壁生长
培养基: 我们推荐使用EliteCell原代平滑肌细胞培养体系
大鼠肺大动脉平滑肌细胞作为体外培养原代平滑肌细胞的培养基。
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
传代方法: 1：2至1：6，每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
细胞鉴定: 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度高于90%。
QC检测: 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
特点和简介
肺动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。由于肺动脉连接着输送静脉血的右心室，所以，肺动脉虽然是动脉，但是它却输送静脉血。血管平滑肌细胞互相连接，形成管状结构;在功能上可以通产生连续收缩，使器官对抗所加负荷而保持原有的形状。该细胞所表达的钙通道表面表达的ICAM-1和VCAM-1，参与血管壁炎症反应。体外培养的肺大动脉平滑肌细胞呈梭形、星形或不规则形。
大鼠肺大动脉平滑肌细胞接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
5) 接到细胞次日，请检查大鼠肺大动脉平滑肌细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
大鼠肺大动脉平滑肌细胞培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术 部 沟通交流。大鼠肺大动脉平滑肌细胞由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
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文献和实验从心脏运输血液到身体各部位的血管的总称。起于左、右心室的主动脉、肺动脉主干为大动脉，管径约25毫米。动脉管径随其分支由大逐渐变小，按管径分大、中、小、微四级。动脉管壁由内膜、中膜、外膜组成。内膜最薄，又分内皮、内皮下层、内弹性膜。内皮邻管腔，由单层内皮细胞组成，表面光滑，可减小血流阻力。内弹性膜下层含胶原纤维、弹性纤维和成纤维细胞。内弹性膜由弹力蛋白组成，膜上有小孔，称窗膜。中膜较厚，由环状排列的平滑肌细胞和弹性纤维组成。外膜疏松，由结缔组织和少量弹性纤维组成，内含营养
表面血丝和粘膜； 2. 将清洗过的大动脉剪成2.5 ~ 3cm的血管段，剥离外膜； 3. 将去外膜的血管段放入培养皿中，纵向剪开管壁，然后使内膜朝上，用小刀片轻轻刮去内膜细胞。加1×PBS洗涤中膜3次，将中膜剪成1mm3的组织块； 4. 将组织块移入50ml离心管中，加入适量0.1%胶原酶Ⅰ溶液，在37℃恒温箱中消化1 ~ 3h，至组织块成絮状为止； 5. 1000r/min，离心5min，去上清。再加入0.125%胰蛋白酶溶液，37℃水浴中搅拌消化5 ~ 10min。用含
我养了快半年的大鼠气道平滑肌细胞，有一点体会，特发上来和各位战友交流一下，互相进步。 壹． 器械 显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干 杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好） 另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干 贰。试剂 D-HANKS液250ml，双抗2ml（青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml），一型胶原
