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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海研生
- 库存:
27
- 英文名:
详见说明书
资源名称 LS 174T
种属 人结肠腺癌细胞
类型 直肠;结直肠腺癌
形态 上皮细胞
提供形式 P4-5代T25细胞培养瓶培养方法
培养基 DMEM培养基(GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。
详细说明
动物种别 人
性别 女
描述 LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
培养细胞冻存方案:
LS 174T以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
具体操作:
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
运输和保存:
LS 174T视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
人白介素12 p40(IL-12 p40)酶联免疫吸附测定试剂盒10103578001
97-30-3高端化学试痉挛性截瘫蛋白11(SPG11)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
异绿原B;Isochlorogenic 订购|咨询 20mg ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 24小鼠CD3分子(CD3)ELISA试盒,CD3 ELISA Kit
人铜蓝蛋白(CP)酶联免疫吸附测定试剂盒11112589001
97-30-3高端化学试铜转运蛋白2(COPT2)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
金丝桃 订购|咨询 HPLC≥98%,10mg/支 ELISA Kit for Human Atrial natriuretic peptide-converting enzyme小鼠促肾上皮质激(ACTH)ELISA试盒,ACTH ELISA Kit
人α-骨胶原交联(α-CTx)酶联免疫吸附测定试剂盒11332473001
阿托伐他汀相关物质C标准品 CAS: 693793-53-2 进口、国产 20mg
枣仁皂苷A;Jujuboside A 20mg 订购|咨询 Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-细胞核-浆蛋白抽提试盒50次国产gersion
LS 174THPLC≥98%Ⅲ型胶原检测试盒5mgCTSD
C20orf94英文名称:Vibrio Parahemolyticus Polar flagellin B/D人氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫试盒
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide英文名称:AAT(Alpha-1Anti-tiypsin)磷酸化胰岛素受体底物-1抗体
HPLC≥98%3氧代5α类固4脱酶2检测试盒5mgDV
C21orf37英文名称:BTBD6人氧化低密度脂蛋白体(OLAb)免疫试盒
RKIP(Raf kinase inhibitor protein)英文名称:ACEI (Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitor )磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 C14ORF140英文名称:phospho-c-Jun(Thr93)人丝虫病抗体(IgG4)免疫试剂盒
HPLC≥98%3型1-鞘受体检测试盒5mgHBV
C22orf15 英文名称:BMPER人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试盒
CHAC2英文名称:Phospho-c-Kit (Tyr730)人丝氨酸肽酶抑制剂,Kazal 1型(SPINK1)免疫试剂盒
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文献和实验chuenshui 细胞株:LS 174T 来源:中科院上海细胞库 培养基 :DMEM 10%小牛血清 问题:刚买回来时传代2次,都没问题。扩大培养时发现,细胞养起来时培养基发紫,0.25%胰酶消化传代,24小时候细胞50%不贴壁,细胞还呈发亮状态。 尝试解决办法:更换培养基,10小时后培养基发紫,细胞依然呈漂浮状态。无解决现象。 请问有什么办法可以解决,培养箱应该没问题,箱子里有同时培养的其他细胞,无异
免疫学研究室细胞库目录 1.癌细胞7株:LS174T, Culu, Lovo, SW111, Colon320, CT26(mouse), HT29 2.胃癌4株:MGC-80, Koto-III, PDGC, SGC-7901 3.胰腺癌2株:SW1990,CP 4.肺癌7株:A549, Calu-3,95D, PLA-801D, QSDA427, LGC, 7901 5.白血病2株:HL60, K562(ATCC) 6.肝癌3株:7721, ALEX, BEL-7402
泥小明 小弟刚开始入手生物实验,弱弱地问一下各个结肠癌细胞株有什么区别啊?实验时候该怎么确定用哪个细胞株? HT-29,SW480,SW620,Caco-2,T84,LoVo,LS174 泥小明 怎么没有人? 发错版块了吗? roy2929 选哪种也要根据实验的吧 比如 检测下要研究的蛋白在哪种细胞系里水平最异常 或者某个表型最明显 然后对这种细胞系展开
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