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- H147-1
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
RL95-2
- 库存：
5000
- 供应商：
蒂科生物
- 细胞类型：
贴壁细胞
- 品系：
人源细胞系
- 组织来源：
人
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
无
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰
- 年限：
永久
- 生长状态：
正常
- 规格：
T25
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
RL95-2 人子宫内膜癌细胞 |
| 货号 |
H147 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮样 |
| 培养条件 |
培养基：90%DMEM/F-12+10%FBS （推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500） 温度：37℃ 气相：95%空气，5%二氧化碳 |
| 传代 |
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1:3到1:5； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。 |
| 保存 |
冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO (备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 |
经供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换新鲜培养基。 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 |
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文献和实验首先要把0.25%的胰酶和培养液在37度水浴20~30分钟(预热)。从培养箱中拿出培养的细胞瓶(一般我是让它长到90%几再传代的)，吸去培养液，可用PBS洗两遍。也可不洗。加入适量0.25%胰酶消化(试瓶子的大小而定，如250毫升的瓶子加1毫升就行了)，让它都浸湿细胞就可以吸去了。等个三十秒就在手上拍打，不要太用劲。就可以看到细胞脱落了，再加入3毫升左右的培养液吹打(这时加的培养液不要太多，否则难吹打成单个细胞!)，制成细胞悬液，再传至消毒的培养瓶中(我一般是1传三，三天后又可以传代了)再加
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