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- 2025年07月13日
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- 文献和实验
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- 供应商：
上海谷研
- 库存：
55
- 英文名：
Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use)
- 规格：
10ml
产品名称： Hoechst 33342 染色液(即用型) 10ug/ml
别名 bisBenzimide H 33342;HOE 33342
英文名称 Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use)
储存条件 -20℃，避光，有效期1年
单位 瓶
Hoechst 33342，也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。Hoechst 33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm。本Hoechst 33342染色液为即用型，可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
使用说明：
1. 对于固定的细胞或组织：
a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
c. 吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2. 对于活细胞或组织：
a. 加入适当量Hoechst 33342染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
b. 在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
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文献和实验细胞是用95％的酒精固定20分钟，PBS洗两遍，hochest33258(100ug/ml)染10分钟，然后PI（100ug/ml）染20分钟，50％甘油封片。至于荧光显微镜的激发波长，我还不是很清楚， midas: 哈哈，反了！应该先染色，后固定！hochest33258对活细胞的损伤稍大一些，最好用hochest33342。终浓度用10ug/ml就可以了！激发波长：hochest用紫外激发；PI用绿光激发！ linger:您曾经发过一张帖子写到“hoechsts33258，hoechst33342
Hoechst33258（或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 （或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液：称取Hoechst33258（或Hoechst33342）1mg，用20ml蒸馏水溶解，过滤，4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液，pH7.0。 固定液：4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化，用PBS洗5min； 或冰冻切片用冰丙酮固定15min，吹干，用PBS洗5min； 或细胞
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色
储存液(1～5mg/ml)，储存于-20℃，用时以培养液稀释至10ug/ml终浓度。对贴壁细胞可以直接弃去培养液，漂洗细胞后直接加入染色液，10-30min后在荧光显微镜下或者激光共聚焦下观察。线粒体状态好时细胞以绿色为主，当红光信号增强时，红绿相叠，以橙色为主。该染色运用于悬浮细胞时还可以通过流式细胞仪进行检测，收集红/绿信号强度，计算其强度比。
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