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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
32
- 英文名:
Polybrene (10mg/ml)
- 规格:
500ul
产品名称:聚凝胺(10mg/ml) DNA转染增强剂
别名 DNA转染增强剂
英文名称 Polybrene (10mg/ml)
储存条件 -20℃,有效期2年
单位 支
Polybrene(聚凝胺,hexadimethrine bromide)是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染,慢病毒介导的基因转染,作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序,因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。
本产品为即用型溶液,粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液,并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1:2000稀释,依细胞种类不同稀释比例不同,具体查阅相关文献。
注:Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。
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聚凝胺(10mg/ml) DNA转染增强剂乌美司,50mg 进口/原装 Oxymatrine 规格:HPLC≥98%,标准品"
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文献和实验血清培养液 (7)HeBs 15%甘油(HeBs/甘油) (8)800mg/L(100×聚凝胺)(肝素对抗物) (9)10%~15%DMSO (10)10cm、6cm培养皿 (11)24孔、6孔培养板 (12)克隆环 1.2操作步骤: (1)转染前,10cm培养皿中接种大约10%~20%皿底面积的包装细胞。 (2)将10μg含抗药基因的逆转录病毒质粒DNA加入0.5mL HeBs中,加入32μL 2mol/L CaCL2,轻振动,加盖30分钟,室温下培养45分钟
,37℃、5%CO2培养,待细胞占50~70%瓶底面积时,用于转染试验。(3)DNA-磷酸钙沉淀物的制备: ①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液,同时向供体细胞DNA液200μl中加入带基因neo质粒DNA液(20mg/L)220μl和2×HBS 250μl(PSV2-neo为1~2mg/L的使用量)。 ②取500μl上述DNA溶液加入硅化试管中,缓慢加入3.1ml、2mol/L CaCl2混匀30秒。 ③然后立即混旋,室温下静置30分钟
in 30 µl ddH2O containing 100 µg/ml RNase (Stock 10mg/ml) 13. Use 0.5~1.0 µl DNA sample for restriction analysis 14. Select bacterial strains with a positive restriction digestion result. Make 10% glycerol bacterial stocks (200 µl of 50% glycerol + 800
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